结核感染T细胞斑点检测技术(T-SPOT.TB)及其临床应用检验科细菌室•肺外结核病占全部结核病的15%-20%•死亡人数占全部结核病死亡数14.1%-17.6%•上升趋势结核病……你真正了解吗?新疆结核病疫情•我区仍然是全国结核病高发省区之一,每年报告肺结核发病人数近5万例。•根据2010年结核病流行病学调查结果,我区活动性肺结核患病率、涂阳肺结核患病率、菌阳肺结核患病率分别为全国平均水平的3.3倍、3倍和3.6倍。关于印发新疆维吾尔自治区结核病防治规划(2011-2015年)的通知WHO潜伏结核感染管理指南(2014)定义(LTBI)机体对结核分枝杆菌抗原刺激产生的持久性的免疫反应,临床上没有任何活动性结核的征象.高风险人群HIV感染者、实体器官移植者、接受TNF-a抑制剂指治疗的患者和免疫介导的炎症性疾病(RA/SLE和其他自身免疫病)、透析患者、血液系统恶性肿瘤患者,包括HSCT者CDC指南高危患者考虑TST和IGRA任何阳性结果应该被认为LTBI的证据使用抗TNF-a治疗前的抗结核治疗(北京胸科医院)•仅仅T-SPOT结果阳性,无其它结核表现,可预防性抗结核治疗3-6个月。•化疗方案:三联方案:异烟肼:0.3/日利福平0.45/日乙胺丁醇0.75/日两联方案:异烟肼:0.3/日利福平0.45/日用药前查肝、肾功能、血、尿常规,用药后2W、4W,以后每4W复查一次。疗程3-6个月。抗结核治疗4W后开始抗TNF-a治疗。结核病诊断技术分子生物学介入诊断影像学结核病诊断细菌学病理学免疫学1.结核抗原、抗体诊断—简便、快速,可以作为结核病的辅助诊断方法之一,但诊断价值有限。2011年WHO正式公告禁止2.PPD(TST)试验—传统的结核感染检测方法•易受BCG接种史和非结核分枝杆菌干扰,特异性低•免疫低下患者中,诊断敏感性低•需要2-3天等待时间免疫学检测手段列入美国、英国等欧美20多个国家结核诊疗指南;美国CDC推荐:BCG接种人群结核感染检测首选;国内专家指南CFDA批准的使用范围:检测血液样本中效应T细胞产生IFN-γ的能力,用于诊断结核杆菌感染。适应症:结核感染的诊断和活动性结核病的辅助诊断T-SPOT.TB(T-SPOT.TB(酶联免疫斑点法酶联免疫斑点法ELISPOT)ELISPOT)1.特异性好,不受卡介苗(BCG)接种与环境分枝杆菌影响;2.灵敏度高,几乎不受个体免疫功能低下影响;3.快速,24h报告结果;4.对肺外结核的诊断尤其有帮助;5.降低医疗事故风险,减少带药诊断的医患纠纷风险。方法学优点方法学优点T-SPOT®.TB诊断性能T-SPOT®.TB临床性能指标•特异性只针对结核分枝杆菌复合群敏感,与绝大多数环境分枝杆菌和卡介苗(BCG)无交叉反应。美国FDA数据:特异性97.1%(297/306)国内临床数据:特异性94.1%(478/508)•灵敏度基本不受免疫力低下/受抑制影响,在肺结核与肺外结核患者中均有很高的检出率。美国FDA数据:灵敏度95.6%(175/183)国内临床数据:灵敏度95.3%(624/655)实验效果图阴性结果阴性结果阳性结果阳性结果空白对照抗原AESAT-6抗原BCFP10阳性对照(PHA)24小时报告结果24小时报告结果阴性结果:A抗原或B抗原斑点数均小于6阳性结果:A抗原或B抗原斑点数任意一个大于等于6,实验结果解释•阴性结果意义提示患者体内不存在针对结核杆菌特异的效应T细胞。排除结核感染——排除结核病——帮助临床鉴别诊断•阳性结果意义提示患者体内存在针对结核杆菌特异的效应T细胞,患者存在结核感染。但是否是活动性结核病,需结合临床症状和其它检测指标综合判断。结核感染——结合临床综合判断——怀疑检测结果判读182名ATB疑似患者中,71名分作肺部疾病组,111名分作肺外疾病组(包括中枢神经系统、外周淋巴结、胸膜、骨骼、生殖泌尿系统等)T-SPOT.TB在肺疾病组和肺外疾病组中的灵敏度分别为95.6%和93.3%,特异性分别为69.2%和88.9%。冯云,张文宏等.PLOSONE,2012(IF=3.53)T-SPOT.TB临床数据Cho等在368例疑诊肺外结核的患者中研究显示,T-SPOT.TB在诊断淋巴结核和骨结核的敏感性为93%,在诊断急性肺外结核(结核性脑膜炎和粟粒性肺结核)的敏感性为79%。ChoOH,KimSH,etal.JInfect,2011(IF=4.073)T-SPOT.TB临床数据骨结核的辅助诊断和鉴别诊断如脊柱结核与强直性脊柱炎、化脓性脊柱炎、腰椎间盘突出、脊柱肿瘤、退...