实验二、真菌一般形态观察和临时玻片制备 【字号：大 中 小】【打印此页】【关闭窗口】 一、目的和要求 熟悉不同临时玻片制作方法；通过观察，认识病原真菌的营养体及其变态，认识真菌的子实体、有性繁殖、无性繁殖产生的各种类型孢子。 二、实验用具 挑针、刀片、木板、酒精灯、火柴、载玻片、盖玻片、纱布、（棉蓝）乳酚油、二甲苯、显微镜、擦镜纸、吸水纸等。 三、内容与方法 1 ．临时玻片的制作 临时玻片制作方法很多，如涂、撕、粘、挑和切片等，可以根据病原物的类型选择使用。 （1）涂抹法：细菌和酵母菌的培养物常用涂抹法制片。将细菌或酵母菌的悬浮液均匀地涂在洁净的载玻片上，在酒精灯火焰上烘干、固定，再加盖玻片封固。加盖玻片前还可进行染色处理，使菌体或鞭毛着色而易于观察。 （2）撕取法：用小金属镊子仔细撕下病部表皮或表皮毛制成临时玻片。 （3）粘贴法：将塑料胶带纸剪成边长 5m m 左右的小块（注意胶带上不要印有指印），使胶面朝下贴在病部，轻按一下后揭下制成玻片。 （4）挑取法：用挑针从病组织或基物（如培养基）上挑取表面的霉状物、粉状物或孢子团制成玻片。 （5）组织透明法：将少量病组织材料切成细丝后放在载玻片上，滴加乳酚油后在酒精灯上徐徐加热至蒸气出现。如此处理数次使组织透明，冷却后加盖玻片进行镜检。此法可以观察到病原物在寄主内的原有状态。 （6）徒手切片：徒手切片时选取病状典型、病征明显的病组织材料，先在病征明显处切取病组织小块（边长 5－8m m ），放在小木块上，用食指轻轻压住，随着手指慢慢地后退，用刀片的刀尖将压住的病组织小块切成很薄的丝或片，用沾有浮载剂的挑针或接种针挑取薄而合适的材料放在一干净载玻片上的浮载剂液滴中央，盖上盖玻片，仔细擦去多余的浮载剂（注意浮载剂过多会使观察物出现晃动不稳定现象），即制成一张临时玻片。 浮载剂： 水：溢菌、线虫活动、真菌孢子萌发、大小测量 – 优点：方便 – 缺点：产生气泡；易干燥 乳酚油：除上述外均可用。 – 优点：杀菌固定、孢子膨胀复原、组织透明 – 缺点：不易封固、有毒 取小麦白粉病叶片，分别用上述 6 种方法制片，观察白粉病菌的分生孢子梗、分生孢子、菌丝和吸器。并比较每种方法分别适于观察白粉菌的什么形态特征。 2 ． 病原真菌的营养体 用挑针挑取平板上培养好的瓜果腐霉病菌（Pythium aphanidermatum）、立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）和链格孢菌（Alt...
