微生物的实验室培养公开课VIP免费

专题2微生物的培养与应用微生物原核:真核非细胞类：细菌、放线菌、支原体、蓝藻等酵母菌、霉菌等真菌：原生生物病毒、类病毒、朊病毒等①种类多；②分布广；③易培养；④个体微小；⑤结构简单；⑥繁殖快；⑦代谢强；⑧易变异。微生物的类群显微藻类：衣藻、小球藻等原生动物：草履虫、变形虫等微生物的特性（一）球菌（二）杆菌（三）螺旋菌肺炎双球菌金黄色葡萄球菌乳酸链球菌大肠杆菌苏云金芽孢杆菌枯草芽孢杆菌霍乱弧菌幽门螺旋菌齿垢密螺旋体细菌的形态细菌的芽孢有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体（不是繁殖体），叫做芽孢。芽孢的壁很厚，含水量极低，抗逆性极强（对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力）。细菌芽孢的结构模式图环境适宜时，芽孢可以萌发，形成一个细菌。菌落具有大小、形状、光泽度、颜色、透明度等基本特征。菌落是鉴定菌种的重要依据。菌落菌落由单个细菌（或其他微生物）细胞或少数同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落。病毒的繁殖吸附注入合成释放组装噬菌斑即噬菌体侵染细菌细胞，导致寄主细胞溶解死亡，因而在琼脂培养基表面形成的肉眼可见的透明小圆斑（“负菌落”）。在适当条件下，一个噬菌体形成一个噬菌斑。课题1微生物的实验室培养1.接种工具：①接种针：直线状，多用于固体培养基穿刺接种。②接种环：环状，常用于细菌和酵母菌的斜面、平板接种。斜面平板接种针、钩、环③接种钩：直角状，多用于霉菌和放线菌的接种。2.涂布器：多用于菌种的分离或微生物平板活菌计数时涂布。3.吸管：0.1、0.2、0.5、1、5、10mL等移液管，常用于液体接种及菌悬液系列稀释。4.试管、培养皿、锥形瓶等5.消毒、灭菌设备：酒精灯、干热灭菌箱、高压蒸汽灭菌锅等。6.无菌实验室、超净工作台等一、概念泛指在分离、接种和培养微生物的操作中，所有防止其他微生物污染的方法。是成功地培养微生物的关键。无菌技术二、范围1.对实验操作空间、操作者衣着和手进行清洁和消毒。2.对培养器皿、接种用具、培养基等进行灭菌。3.在酒精灯旁操作4.已灭菌的材料与周围的物品分开。2.煮沸消毒法在100℃煮沸5～6min可以杀死微生物细胞和部分芽孢。3.化学药物消毒法①酒精消毒：使细胞脱水、蛋白质变性。②氯气消毒：氯气溶于水形成盐酸和次氯酸，次氯酸可放出新生态的氧，从而杀死细胞。三、消毒、灭菌（一）消毒：较为温和理化方法，杀死部分有害菌体（不包括芽孢、孢子）1.巴氏消毒法70℃～75℃煮30min或在85℃煮15min；杀灭非芽孢致病菌，不破坏物料原风味；适用于对牛奶、啤酒等消毒。③其他：升汞、高锰酸钾、臭氧、甲酚皂、醋酸等等。干热灭菌箱内160～170℃1～2小时，适用于耐高温、需保持干燥的物品（吸管、培养皿）和金属用具等。在酒精灯火焰（200℃以上）上灼烧，灭菌简捷可靠。适用于接种环、接种针、接种钩等金属用具以及试管口、三角瓶口灭菌1.灼烧灭菌2.干热灭菌（二）灭菌：强烈的理化方法，杀死所有微生物（包括芽孢、孢子）4.紫外线（260nm）消毒法抑制DNA的复制；产生臭氧，辅助杀菌。适用于空气及物体表面消毒或灭菌。4.其他灭菌方法：紫外线、超声波、微波、化学药物灭菌等。3.高压蒸汽灭菌100KPa、121℃、15～30min；加压是为了提高温度，达到灭菌的目的。因此必须当灭菌锅内的冷空气完全排尽后，再将锅关闭，继续加热。适用于培养基灭菌。附：实验室的消毒与灭菌对接种室、接种箱、超净工作台喷洒适量的石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液后，用紫外线照射30min。讨论:1．在高压蒸汽灭菌开始以前，为什么要将灭菌锅内的冷空气排尽？在高压蒸汽灭菌以前，如果高压蒸汽灭菌锅内的冷空气没有排尽，当压力上升到100kPa时，锅内的温度就不会上升到应有的高度，导致灭菌不彻底。2．灭菌完毕以后，如果压力未降到0就打开排气阀，会出现什么现象？为什么？如果压力未降到零就打开排气阀，试管内的培养基就会冲出管口。这是因为高压蒸汽灭菌锅内外压力不平衡的缘故3．接种操作为什么一定要在火焰旁边进行？空气中存在有大量的微生物，而接种灯的火焰旁能形成一个无菌区域，在这里操作，可以避...