细菌的人工培养与生化反应病原生物学与免疫学教研室授课教师：联系方式：时间：2018年1月病原生物学实验实验三教学内容细菌的人工培养一、细菌的生化反应二、能够正确使用接种细菌用具；能够理解接种细菌的环境要求并领会无菌操作要领无菌操作与观念能够正确地操作平板划线法、斜面和半固体培养基的接种方法；能熟练、规范、正确地进行生化反应实验。操作正确能说出细菌人工所需要的条件。细菌培养条件能够根据目的需要选择正确的接种方法；能理解生化反应、糖发酵试验、硫化氢试验、吲哚试验的原理。理解原理[教学目标]能正确判断实验结果，并对结果进行合理分析讨论。结果判断并分析一、细菌的人工培养一、细菌的人工培养基本知识（一）细菌人工培养的基本知识1.细菌人工培养的目的感染性疾病的病原学诊断鉴定细菌，指导临床用药。细菌学研究用于细菌生理、遗传变异、致病性和耐药性等研究。生物制品的制备疫苗、抗毒素等的制备。一、细菌的人工培养基本知识（一）细菌人工培养的基本知识2.细菌人工培养的基本步骤制备培养基接种培养一、细菌的人工培养基本知识（一）细菌人工培养的基本知识3.细菌培养基的种类根据营养组成和用途可分为基础、增菌、选择、鉴别、厌氧根据物理状态分为液体、固体、半固体鉴别培养基一、细菌的人工培养基本知识（一）细菌人工培养的基本知识3.细菌培养基的种类普通平板血平板半固体培养基液体培养基一、细菌的人工培养基本知识（一）细菌人工培养的基本知识4.培养基的制备调配成分溶解矫正pH过滤澄清分装灭菌质量检查和保存一、细菌的人工培养基本知识（一）细菌人工培养的基本知识5.细菌培养方法需氧培养法二氧化碳培养法厌氧培养法一、细菌的人工培养基本知识（一）细菌人工培养的基本知识5.细菌培养方法需氧培养法二氧化碳培养法厌氧培养法二氧化碳培养箱电热恒温培养箱一、细菌的人工培养基本知识（一）细菌人工培养的基本知识5.细菌培养方法烛缸二氧化碳培养法厌氧袋一、细菌的人工培养操作内容（二）细菌人工培养操作1.操作内容操作内容目的平板分区划线分离细菌斜面纯培养增菌及菌种保存半固体培养观察动力和菌种保存一、细菌的人工培养实验材料（二）细菌人工培养操作2.材料工具：接种环、接种针菌种：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌培养基：普通平板培养基、斜面培养基、半固体培养基一、细菌的人工培养实验材料（二）细菌人工培养操作2.材料斜面培养基(2-3%琼脂)半固体培养基(0.2-0.5%琼脂)普通平板培养基(2-3%琼脂)一、细菌的人工培养操作流程（二）细菌人工培养操作3.操作流程领取菌种及培养基分别进行平板、斜面及半固体培养基接种，然后贴上标签。37度恒温箱培养18～24小时后观察结果。一、细菌的人工培养实验方法及结果（二）细菌人工培养操作4.实验方法及结果•平板分区划线法分区划线结果一、细菌的人工培养实验方法及结果（二）细菌人工培养操作4.实验方法及结果•斜面纯培养一、细菌的人工培养实验方法及结果（二）细菌人工培养操作4.实验方法及结果•半固体培养结果穿刺接种二、细菌的生化反应二、细菌的生化反应（一）生化反应基本原理基本原理不同的细菌含有不同的分解代谢的酶具有不同的分解代谢途径对同一营养物质的分解代谢及其产物有所不同知识点利用生化方法检测代谢产物以判断细菌的分解代谢特征，从而达到鉴定细菌的目的。称：细菌的生化反应检测法二、细菌的生化反应常见的生化反应基本原理对糖的发酵甲基红试验单糖发酵试验VP试验对蛋白质的分解吲哚试验硫化氢试验枸橼酸盐利用试验尿素酶试验其他试验二、细菌的生化反应（二）实验材料实验材料1.菌种大肠埃希菌、沙门氏菌2.微量生化反应管葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖、甘露醇、蛋白胨水（靛基质）、硫化氢。3.试剂吲哚试剂二、细菌的生化反应（三）实验操作内容糖发酵试验1.糖发酵试验（1）原理大肠埃希菌：分解乳糖产酸产气致病性肠道细菌：大多数不分解乳糖CO2↑+H2↑糖\醇类细菌产生的酶酸（HCOOH)脱氢酶（培养基含葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇或蔗糖等一种糖类，并加酸碱指示剂，如溴甲酚紫）二、细菌的生化反应（三）实验操作...
