1.鉴别植物细胞质类型的方法及其优缺点。油菜品种 (系)的细胞质，可分为可育胞质(N)和不育胞质 (s)两大类。正确鉴定各种品种 (系)的细胞质类别．是重要的基础工作，对选育油菜三系有十分重要意义。如果明确某品种 S 胞质．那么．以它作母本，分别与其他许多品种作父本杂交， 其后代就可能出现雄性不育。目前，油菜细胞质类型主要通过普通遗传学方法、线粒体基因组DNA 的限制性酶切片段长度多态性（即mtDNA-RFLP ）标记 2 种进行鉴定。鉴定品种细胞质类别的普通遗传学方法，是用待制细胞质类别的品种(系)作母本，用已有的保持系[N(rfrf)] 或不育系 [S(rfrf)] 的微量花粉作父本做人工去雄杂交． FI 代一般可育， 播种 F1 代自交产生的 F2代种子，开花时鉴定 F2 代植株的育性表现。 如 F2 代群体育性无分离(即全部为可育 )，则证明披测定的品种 (系)具有正常可育 (N)胞质；相反，如F2 代群体有育性分离 (出现不育株 )、则证明被测定品种 (系)具有不育 (s)胞质。其遗传原理如下：待测定未知细胞质类别的5 种(系)可能基因型有S(RfRf) 、N(RfRf) 、N(rfrf) 等类。如待测品种 (系)为 S(RfRf)、N(RfRf) ，以？代表不明确的细胞质．那么其原理如下图所示；特点：费时费力， 且每种杂交组合只能确定待鉴定油菜和某种已知细胞质类型油菜是否为相同的细胞质。例如，利用Polima 的保持系“湘矮 B”为测交种，只能鉴定待测材料的细胞质是否Polima；如果不是，则它到底是那种类型， 还要用其他细胞质类型的保持系做测验种，进行上述试验。随着分子生物学理论和技术的发展，有些研究者已通过分离提取油菜线粒体基因组（ mtDNA ），利用 mtDNA-RFLP 标记区别和鉴定油菜各种细胞质类型。特点：利用mtDNA-RFLP 标记鉴定油菜细胞质类型的方法，与普通遗传学方法比较， 实验周期大大缩短， 但是该方法需分离纯化油菜线粒体和提取线粒体DNA ，以及进行 mtDNA 的限制性酶切和酶切片段的分离检测，操作程序繁琐、复杂、技术难度大而且成本高。目前，甘蓝型油菜Nap 细胞质类型的线粒体全基因组已被测序。国内外研究已表明，不同油菜细胞质类型的mtDNA 组织结构差异较大；油菜细胞质雄性不育系的线粒体基因组中具有与其细胞质雄性不育相关的特异基因片段。研究已揭示出Ogu、Nap 和 Pol 等不育系的不育性状相关的线粒体基因序列分别为其mtDNA的特异读码框Orf138、orf222/nad5c、以及Orf224/atp6。危文亮等根据油菜...
