第三讲固液分离固液分离发酵液胞外上清液/滤液预处理提取生化物质的第一步,分两部分:胞内富集细胞目的一影响发酵液固液分离的因素一影响发酵液固液分离的因素11)发酵液中悬浮离子的大小)发酵液中悬浮离子的大小22)发酵液的黏度)发酵液的黏度viscosityviscosity::固液分离速度通常与粘度成反比,粘度越大,固液分离速度通常与粘度成反比,粘度越大,固液分离越困难固液分离越困难影响粘度的因素影响粘度的因素::菌体的种类和浓度(重要因素),通常丝状菌、动物或菌体的种类和浓度(重要因素),通常丝状菌、动物或植物细胞悬浮液粘度较大,浓度增大,粘度也提高
植物细胞悬浮液粘度较大,浓度增大,粘度也提高
培养液中蛋白质、核酸大量存在:通常细胞破碎或细胞培养液中蛋白质、核酸大量存在:通常细胞破碎或细胞自溶后粘度增大
因此细胞破碎的程度应控制,发酵放自溶后粘度增大
因此细胞破碎的程度应控制,发酵放罐时间要适宜
罐时间要适宜
培养基成分:如用黄豆粉、花生粉作氮源,淀粉作碳源,培养基成分:如用黄豆粉、花生粉作氮源,淀粉作碳源,粘度都会升高
粘度都会升高
此外,某些染菌发酵液,如染细菌,则粘度会增大
此外,某些染菌发酵液,如染细菌,则粘度会增大
发酵过程的不正常处理,如大量过剩的培养基和消沫油发酵过程的不正常处理,如大量过剩的培养基和消沫油加入,都会使粘度增大
加入,都会使粘度增大
二常见的固液分离方法二常见的固液分离方法过滤过滤filtrationfiltration离心离心CentrifugationCentrifugation膜分离膜分离membraneseparationmembraneseparation双水相萃取双水相萃取ATPSATPS扩张床吸附扩张床吸附EBAEBA((一)过滤一)过滤filtrationfiltration过滤介质过滤介质filterme