第三讲固液分离固液分离发酵液胞外上清液/滤液预处理提取生化物质的第一步,分两部分:胞内富集细胞目的一影响发酵液固液分离的因素一影响发酵液固液分离的因素11)发酵液中悬浮离子的大小)发酵液中悬浮离子的大小22)发酵液的黏度)发酵液的黏度viscosityviscosity::固液分离速度通常与粘度成反比,粘度越大,固液分离速度通常与粘度成反比,粘度越大,固液分离越困难固液分离越困难影响粘度的因素影响粘度的因素::菌体的种类和浓度(重要因素),通常丝状菌、动物或菌体的种类和浓度(重要因素),通常丝状菌、动物或植物细胞悬浮液粘度较大,浓度增大,粘度也提高。植物细胞悬浮液粘度较大,浓度增大,粘度也提高。培养液中蛋白质、核酸大量存在:通常细胞破碎或细胞培养液中蛋白质、核酸大量存在:通常细胞破碎或细胞自溶后粘度增大。因此细胞破碎的程度应控制,发酵放自溶后粘度增大。因此细胞破碎的程度应控制,发酵放罐时间要适宜。罐时间要适宜。培养基成分:如用黄豆粉、花生粉作氮源,淀粉作碳源,培养基成分:如用黄豆粉、花生粉作氮源,淀粉作碳源,粘度都会升高。粘度都会升高。此外,某些染菌发酵液,如染细菌,则粘度会增大。此外,某些染菌发酵液,如染细菌,则粘度会增大。发酵过程的不正常处理,如大量过剩的培养基和消沫油发酵过程的不正常处理,如大量过剩的培养基和消沫油加入,都会使粘度增大。加入,都会使粘度增大。二常见的固液分离方法二常见的固液分离方法过滤过滤filtrationfiltration离心离心CentrifugationCentrifugation膜分离膜分离membraneseparationmembraneseparation双水相萃取双水相萃取ATPSATPS扩张床吸附扩张床吸附EBAEBA((一)过滤一)过滤filtrationfiltration过滤介质过滤介质filtermediumfiltermedium::过过滤采用的多孔物质;滤采用的多孔物质;滤浆滤浆filterpulpfilterpulp::所处理的所处理的悬浮液;悬浮液;滤液滤液filtratefiltrate::通过多孔通道通过多孔通道的液体;的液体;滤饼或滤渣滤饼或滤渣filtercake:filtercake:被截被截留的固体物质。留的固体物质。过滤介质选择过滤介质选择过滤介质起过滤作用,还是滤饼的支撑物。应具有足过滤介质起过滤作用,还是滤饼的支撑物。应具有足够的机械强度和尽可能小的流动阻力合理选择过滤介够的机械强度和尽可能小的流动阻力合理选择过滤介质质过滤介质所能截留的固体粒子大小:通常以过滤介质过滤介质所能截留的固体粒子大小:通常以过滤介质的孔径表示。常用的过滤介质中,纤维滤布所能截留的孔径表示。常用的过滤介质中,纤维滤布所能截留的最小粒子约的最小粒子约10μm10μm,硅藻土为,硅藻土为lμmlμm,超滤膜可小,超滤膜可小于于0.5μm0.5μm过滤介质的透过性:是指在一定的压力差下,单位时过滤介质的透过性:是指在一定的压力差下,单位时间单位过滤面积上通过滤液的体积量,间单位过滤面积上通过滤液的体积量,它取决于过滤它取决于过滤介质上毛细孔径的大小及数目介质上毛细孔径的大小及数目过滤介质过滤介质--织物介质织物介质又称滤布,应用最广泛,包括由棉、麻等天然纤维滤布和合成又称滤布,应用最广泛,包括由棉、麻等天然纤维滤布和合成纤维滤布。纤维滤布。其过滤性能受许多因素的影响,其中最重要的是纤维的特性、其过滤性能受许多因素的影响,其中最重要的是纤维的特性、编织纹法和线型。编织纹法和线型。最高温度℃最高温度℃密度密度(kg(kg//mm33))吸水率%吸水率%耐磨耐磨棉棉尼纶尼纶涤纶涤纶9292105105——12012014514515515511411413813816-2216-226.5-8.36.5-8.30.04-0.080.04-0.08良良优优优优滤滤液液澄清度澄清度阻力阻力滤饼中滤饼中含含水水滤饼滤饼脱落脱落寿命寿命堵孔堵孔倾向倾向平纹平纹斜纹斜纹缎纹缎纹依依次次降降依依次次降降依依次次减减依依次次易易中中长长短短依依次次易易过滤介质过滤介质--粒状介质粒状介质有硅藻土、珍珠岩粉、细砂、活性炭、白土等有硅藻土、珍珠岩粉、细砂、活性炭、白土等最常用的是硅藻土,是优良的过滤介质:最常用的是硅藻土,是优良的过滤介质:①①一般不...