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抗原抗体反应VIP免费

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第二章抗原抗体反应体内体外:凝集、沉淀、溶细胞、中和毒素杀菌、溶菌、中和毒素、促进吞噬免疫病理损伤:超敏反应性疾病血清学反应抗原抗体反应是指抗原与相应抗体在体内和体外发生的特异性结合反应第一节抗原抗体反应的原理抗原抗体反应:指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。物质基础:抗原表位与抗体高变区间的互补结合抗原抗体之间的可逆的弱的结合力在极短距离内才可以发生一、抗原抗体结合力静电引力:又称库伦引力指带电离子基团(如:—NH3+和—COO-)之间的引力,距离越近引力越大。范德华引力:原子与原子、分子与分子相互接近时分子极化作用发生的一种吸引力,其决定分子空间构型。能量小于静电引力。氢键:由分子中H原子与电负性大的0和N原子等相互作用形成的引力,结合力较范德华力强,因为需要受氢体和供氢体之间的互补形成氢键,因此更具有特异性。疏水作用力:疏水集团相互排斥水分子而趋于聚集的力。作用力最强,占总结合力的50%。抗原抗体结合力•只有两个分子表面密切接触时,才能产生足够的力使其结合•大小都与两个分子间的距离密切相关•抗原与抗体之间高度的空间互补结构正好为这些结合力的发挥提供了条件抗原结合价:抗原分子上能与抗体分子结合的抗原表位的总数称为抗原结合价(antigenicvalence)。大分子物质含多个抗原表位半抗原只有一个抗原表位抗体的结合价:抗体结合抗原表位的数目。Ig单体为双价分泌型IgA为?价五聚体IgM为?价抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间的结合强度,用平衡常数K值表示,K值越高抗原抗体结合越牢固亲和性(affinity)二、抗原抗体的亲和性和亲合力取决于抗原抗体两者空间构型互补的程度Avidity•TheoverallstrengthofbindingbetweenanAgwithmanydeterminantsandmultivalentAbsKeq=104Affinity106Avidity1010AvidityAvidity•TheoverallstrengthofbindingbetweenanAgwithmanydeterminantsandmultivalentAbsKeq=104Affinity106Avidity1010Avidity一个完整的抗体结合部位与若干个抗原表位之间结合的强度亲合力(avidity)亲合力与亲和性、抗体的结合价、抗原的有效抗原表位数目有关。亲合力大小与谁有关?形成可见抗原抗体反应三、亲水胶体转化为疏水胶体抗原/抗体带负电碱性水化层包绕抗原/抗体亲水胶体抗原/抗体结合表面电荷减少,水化层变薄,失去亲水性电介质中和胶体粒子表面电荷,使各疏水胶体进一步靠拢疏水胶体抗原/抗体第二节抗原抗体反应的特点特异性可逆性比例性阶段性特异性:抗原与抗体结合反应的专一性分子基础:抗原表位与抗体分子高变区之间空间构型的互补性一、特异性一把锁只爱一把钥匙,一把钥匙永远忠于一把锁!两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位,可与彼此相应的抗血清发生反应交叉反应(crossreactions)好的方面:坏的方面:二、可逆性可逆性:抗原与相应抗体结合成复合物后,在一定条件下又可解离为游离抗原与抗体的特性(非共价键结合)影响因素:抗体对相应抗原的亲合力越高,结合越牢固,越不易解离环境因素对复合物的影响-pH(破坏离子间的静电引力)、离子强度(破坏离子间的静电引力)亲和层析前带(prezone):抗体过量后带(postzone):抗原过量等价带(equivalencezone):抗原抗体比例合适横坐标:抗体量恒定,抗原逐渐增加比例性:抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系三、比例性纵坐标:抗原-抗体沉淀物形成的量Ab/Ag比例适当抗体的两个Fab段分别结合两个Ag分子,相互交叉结合连接成巨大的网格状立体聚合物(可见)Ab/Ag过剩过剩方的结合价得不到饱和,大多数游离存在,只形成小分子复合物(不可见)带现象:由于抗原或抗体过量,形成免疫复合物少,沉淀物少,上清液中可测出游离的抗原或抗体免疫学检测时,由于带现象的干扰,导致假阴性结果注意确定Ag-Ab浓度非常重要,在实验中要对Ag/Ab进行适当稀释1.固定低含量(Ag/Ab)的浓度,稀释高含量的(Ag/Ab)2.如果是可溶性Ag稀释Ag,颗粒性Ag稀释Ab第一阶段:特异性结合阶段,反应快,不可见(数秒或数分钟内完成)第二阶段:反应可见阶段,反应慢(数分钟或数小时或数日)),出现凝集、沉淀和...

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