现代色谱理论

第二章 现代色谱理论 色谱法(Chromatography)是一种分离分析方法。它是利用各物质在两相中具有不同的分配系数，当两相作相对运动时，这些物质在两相中进行多次反复的分配来达到分离的目的。 俄国植物学家M.Tswett 于1906 年首先提出色谱法。 色谱法分类 流动相 名 称 固 定 相 名 称 气体 气相色谱 固 体 气固色谱 液 体 气液色谱 液体 液相色谱 固体吸附剂 液固色谱 液 体 液液色谱 键合固定相 键合相色谱 多孔固体 尺寸排阻色谱 离子交换剂 离子交换色谱 纸纤维中的水 纸色谱 固体吸附剂 薄层色谱 超临界流体 超临界流体色谱 类似LC 超临界流体色谱 按分离机理： 吸附色谱 分配色谱 离子交换色谱 凝胶色谱法或尺寸排阻色谱（选择渗透） 亲和色谱法 第一节 色谱法中常用参数 一、色谱流出曲线 1 保留值 221ln22σWσ4bW死时间t0 保留时间tR 调整保留时间t’R ：t’R =tR-tO 死体积，保留体积，调整保留体积 2 区域宽度 半峰宽 峰底宽 标准偏差σ ：0.607 倍峰高处的色谱峰宽度的一半 3 容量因子ｋ’ 一定的温度、压力条件下，分配达平衡时，组分在两相中的总量之比称分配比k′，又称容量因子。 k′与 K（分配系数）的关系为： 相对保留值 ： 4 柱效率 塔板理论 理论塔板数可按下式计算： 有效塔板数ｎeff 有效塔板高 msWWK 组分在流动相中的总量组分在固定相中的总量'β''KVVKVWVWccKsmsmmsmsβKVVKkms '')1()2(')1(')2(')1()2(1,2RRVVkkKKαnLH 22122121)(54.5)(54.5)(54.5WdWVWtnRRR222)(16)(16)(16bRbRbRWdWVWtn Heff＝L/ｎeff =H[(1+k’)/k’]2 表示色谱流出的曲线可以近似地采用对称的 Gau ss 正态分布曲线来描述。然而在实际工作中，色谱工作者从来就没有得到过真正的 Gau ss 型色谱峰。无数次的实验实验证明，正常的色谱峰都是非对称的拖尾峰。随着柱管效率的不断提高，色谱峰的非对称性越来越明显。 5 分离度 组分的保留时间的差别取决于固定相的热力学性质，差别越大，表示固定相对组分的选择性越高；两峰底宽越窄，表示柱效越高。 Rs=1.5，此时，两组分的分离程度达 99.87%，因此用 Rs =1.5 作为相领两峰完全分离的指标。当 Rs=1.0 时，两峰分离程度达 97.72%。如果两峰的高度相差 10 倍，当 Rs=1.0 时，低含量组分的分离程度只有 88%，因为两峰交叉―污染‖时，在低含量组分...