第一章 发酵液的预处理 5 第二章 发酵液的预处理和固液分离技术 2 .1 发酵液预处理 微生物发酵和细胞培养的目标产物主要有菌体、胞内产物和胞外产物三类物质。从发酵液和细胞培养液中提取所需的生化物质,第一步就需进行预处理,以便于固液分离,使代谢产物后续的分离纯化工序顺利进行。其 原因有三个方面:首先,发酵液多为悬浮液,粘度大,为非牛顿型流体,不易过滤,而所需的生化物质往往只有分布在液相,才能有效地提纯。并且,在有些发酵液中,菌体自溶,核酸、蛋白质及其他有机粘性物质这三类物质会造成滤液混浊、滤速极慢,必须设法增大悬浮物的颗粒直径,提高沉降速度,以利于过滤;其次,目标产物在发酵液中的浓度通常较低;此外,发酵液的成分复杂,大量的菌丝体、菌种代谢物和剩余培养基会对提取造成很大的影响。所以,对发酵液进行适当的预处理,从而分离细胞、菌体和其他悬浮颗粒(如细胞碎片、核酸以及蛋白质的沉淀物),并除去部分可溶性杂质和改变发酵液的过滤性能,是生化物质分离纯化过程中必不可少的首要步骤。 预处理方法要根据发酵产品、所用菌种和发酵液特性来选择。大多数发酵产品存于发酵液中,少数存于菌体中,而发酵液和菌体中都有产物存在的情形也比较常见。如果目的产物是胞外产物,则通过离心或过滤实现固液分离,使其转入液相;而对于胞内产物而言,收集细胞是预处理的首要一步。细胞经破碎或整体细胞萃取使目的产物释放,转入液相,再进行细胞碎片的分离。如果所需的产物为细胞,离心或过滤所得固相经干燥等过程就可得到菌体。图 1-1为生化产品分离纯化的一般步骤,图中虚线以上为预处理过程示意图。 第一章 发酵液的预处理 6 图 1-1 生化产品分离纯化的一般步骤[1] 2 .1 .1 预处理简述 发酵液经过预处理,一些物理性质会改变,从悬浮液中分离固形物的速度随之提高,过滤操作更易进行;在预处理过程中,产物大多转移进入易于后处理的第一章 发酵液的预处理 7 相中(一般为液相)。同时,发酵液中的部分杂质也得以去除。 发酵液的预处理过程一般包括以下几部分: (1)发酵液杂质的去除:包括除去蛋白质、无机离子以及色素、热原质、毒性物质等有机物质。 (2)改善培养液的处理性能:主要通过降低发酵液的粘度,调节适宜的pH值和温度[1]及絮凝与凝聚等操作来实现。 预处理在生物技术产品的加工和提纯过程中相当重要。目的产物不同,采用的预处理方法也不同。并且,由于具体发酵液的...