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gateway技术

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Gateway 技术提供以下可能: 通过去除冗长的亚克隆步骤节省您的时间 同时将您的基因转移到多个表达系统 在任何您选择的系统――体外,细菌,酵母,昆虫,或哺乳动物――分析表达 一、一种更好的克隆方法 Gateway 技术能够克隆一个或多个基因进入到任何蛋白表达系统(图 1)。这项强大的体外技术大大地简化了基因克隆和亚克隆的步骤,而同时典型的克隆效率高达95%或更高。当基因在目的表达载体之间快速简便的穿梭时,还可以保证正确的方向和阅读框。Gateway 也有助于进行带不同数目纯化和检测标签蛋白的表达。 图 1 Gateway 技术的灵活性 Gateway 技术:克隆、表达新方法 - zhchyuan2008 - zhchyuan2008 的博客 目的基因克隆进入门载体后,可以同时转移目的基因到多个目的载体。 Gateway 利用了位点特异重组,所以在构建入门载体后,不再需要使用限制性内切 酶 和 连 接 酶 。 一 旦 您 拥 有 了 一 个 入 门 克 隆 , 就 可 以 多 次 使 用 它 , 转 移 您 的 目 的基 因 到 Gateway 改 造 过 的 各 种 表 达 载 体 ( 目 的 载 体 ) 。 此 外 , 由 于 在 重 组 时 DNA 片 段 的 阅 读 框 和 方 向 保 持 不 变 , 因 而 您 不 必 再 为 新 的 表达 克 隆 测 序 担 心 。 在 使 用 每 一 种 新 的 表 达 系 统 时 , 将 会 节 省 您 更 多 的 时 间 。 二 、 一 项 强 大 而 可 靠 的 技 术 Gateway 技 术 是 克 隆 和 亚 克 隆 DNA 序 列 的 一 项 新 颖 的 通 用 系 统 , 便 于 功 能 基 因 的分 析 和 蛋 白 质 的 表 达 。 一 旦 进 入 这 个 多 功 能 的 操 作 系 统 , DNA 片 段 可 以 通 过 位 点特 异 的 重 组 在 载 体 之 间 转 移 。 Gateway 技 术 是 基 于 已 研 究 的 非 常 清 楚 的 λ 噬 菌 体 位 点 特 异 重 组 系 统 ( attB x attP → attL x attR) 。 BP 和 LR 两 个 反 应 就 构 成 了 Gateway 技 术 ( 表 1 和 图 2) 。BP 反 应 是 利用 一 个 attB DNA 片 段 或表 达 克 隆 和 一 个 attP 供体 载 体 之 间 的 重 组反 应 , 创建一 个 入 门 克 隆 。 LR 反 应 ...

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