精品文档---下载后可任意编辑CGRP 对 HaCaT 细胞增殖和凋亡及分泌 NGF 的影响的开题报告引言:醉鱼草素和醉鱼草吖啶啉是通过靶向 CGRP(钙卡尔受体肽)和其受体而被发现作为有效治疗药物,CGRP 是一种神经肽,在痛苦传递、神经炎症以及毛发生长等多种生理和病理过程中发挥重要作用
然而,CGRP 对角化表皮细胞增殖、凋亡和神经生长因子(NGF)分泌的影响尚不清楚
因此本实验旨在讨论 CGRP 对 HaCaT 角化表皮细胞增殖、凋亡和 NGF 分泌的影响
材料和方法:1
HaCaT 细胞系:HaCaT 细胞培育于 10%FBS 的 DMEM 培育基中
实验设计:第一组:正常细胞组第二组:CGRP 处理组(0
1、1 和 10nmol/L 浓度)第三组:CGRP+注射剂组(0
1、1、10nmol/L 浓度)第四组:CGRP+注射剂组(10mg/kg 体重)
细胞增殖试验:MTT 法检测 CGRP 对 HaCaT 细胞增殖的影响
将 HaCaT 细胞分成四组,每组1000 个细胞,分别处理 0
1、1、10 nmol/L 的 CGRP,培育 72 小时
然后加入MTT 溶液,最后用 DMSO 进行溶解,读取 A490 值
细胞凋亡检测:凋亡检测采纳 Annexin V-FITC/PI 染色体系来测定细胞凋亡率
将 HaCaT 细胞分成四组,分别处理 0
1、1、10 nmol/L 的 CGRP,培育 72 小时
然后加入Annexin V-FITC/PI 染色体系染色,最后通过流式细胞术分析细胞存活、早期凋亡、晚期凋亡三种细胞状态的比例
NGF 分泌检测:ELISA 法检测 CGRP 对 HaCaT 细胞分泌 NGF 的影响
将 HaCaT 细胞分成四组,分别处理 0
1、1、10 nmol/L 的 CGRP,培育 72 小时
然后通过 ELISA 法检测细胞培育