精品文档---下载后可任意编辑CREG 对人动脉内皮细胞单层通透性的影响及调控机制的讨论的开题报告一、讨论背景和意义动脉粥样硬化是一种常见的、进展性的、具有多因素性的慢性疾病，其发病和进展涉及多种因素，其中包括内皮细胞单层通透性的改变。内皮细胞单层通透性的改变会导致血管内膜透明度降低，肿物细胞和各种蛋白质进入血管内膜，加重血管炎症反应，使粥样斑块侵袭内膜和进展成为缺血性心血管疾病的主要原因之一。因此，讨论内皮细胞单层通透性的调控机制对于预防和治疗动脉粥样硬化等心血管疾病具有重要的意义。CREG（Cellular Repressor of E1A-stimulated Genes）是一种新颖的多功能蛋白，参加细胞增殖和分化、凋亡调控、细胞核质转移和稳态等多种生物学过程。在很多种细胞中都有表达，包括心血管系统中的内皮细胞。CREG 在调控内皮细胞单层通透性方面的作用还没有被充分探讨，因此本讨论将分析 CREG 对内皮细胞单层通透性的影响及其调控机制。二、讨论目标和内容本讨论旨在探究 CREG 对人动脉内皮细胞单层通透性的影响及其调控机制。具体来说，将实验室培育的人动脉内皮细胞分为对比组和CREG 过表达组，通过荧光显微镜观察细胞单层通透性的变化，评价CREG 对内皮细胞单层通透性的影响。同时，通过 Western blot 和 RT-qPCR 检测内皮细胞的相关分子表达水平，讨论 CREG 对内皮细胞信号通路和通透性相关蛋白表达的影响，进一步探讨 CREG 调控内皮细胞单层通透性的机制。三、讨论方法和技术路线（1）实验材料：人动脉内皮细胞、PCMV-CREG 和空载体质粒、TRITC-dextran（分子量 40kDa）（2）实验步骤：1）体外培育和细胞分组：将人动脉内皮细胞以适当的密度等量分配到对比组和 CREG 过表达组。2）CREG 过表达：将空载体和 PCMV-CREG 质粒转染入内皮细胞，达到 CREG 过表达的目的。精品文档---下载后可任意编辑3）单层通透性实验：将 TRITC-dextran 添加到细胞培育液中，利用荧光显微镜观察内皮细胞单层通透性的变化，评价 CREG 对内皮细胞单层通透性的影响。4）Western blot 和 RT-qPCR：检测内皮细胞相关分子表达水平，讨论 CREG 对内皮细胞信号通路和通透性相关蛋白表达的影响，进一步探讨 CREG 调控内皮细胞单层通透性的机制。（3）技术路线：图 1 讨论方法和技术路线图四、讨论预期成果本讨论可望为动脉粥样硬化等心血管疾病的预防和治疗提供新的、有益的实验数据，明确 CREG 在内皮细胞单层通透性调控中的作用及其相关机制。同时，本讨论也将为进一步讨论 CREG 在动脉粥样硬化中的作用提供新的思路和方向。
