精品文档---下载后可任意编辑Dab2 下调及异常甲基化促进肺癌的发生进展的开题报告一、选题背景与意义肺癌是近年来世界上死亡率最高的肿瘤疾病之一，其发病机制复杂，存在多种相关分子机制。近年来的讨论表明，DNA 甲基化参加了肺癌的起始和进展过程，并且 DNA 甲基化异常是肺癌的基本遗传学特征之一。另外，Dab2 作为一个细胞信号传递蛋白，它在肺癌的发病与进展中也发挥着关键的作用。而目前对于 Dab2 及其调控 DNA 甲基化在肺癌中的作用讨论还比较匮乏。因此，本讨论将探讨 Dab2 下调及异常甲基化对于肺癌的发生进展的影响机制，以期为肺癌的防治提供基础讨论支持。二、讨论内容本讨论将通过以下几个方面来探讨 Dab2 下调及异常甲基化在肺癌发生进展中的作用：1. 采纳 RT-PCR 和 Western blot 等方法检测 Dab2 在肺癌组织及细胞系中的表达水平，同时检测 Dab2 调节 DNA 甲基化的可能性。2. 采纳甲基化靶向树突状 DNA 技术对 Dab2 的甲基化水平进行检测，进一步明确 Dab2 的甲基化模式是否参加了肺癌的发病与进展。3. 通过细胞生物学实验检测 Dab2 与 DNA 甲基化的关系对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响，探讨 Dab2 及 DNA 甲基化在肺癌中的作用机制。三、技术路线1. 实验材料a）肺癌细胞系：A549、H1299、H1975 等b）肺癌组织及癌旁组织标本2. 实验方法a）细胞培育及转染采纳 DMEM 培育细胞，分别转入 siRNA 和甲基化靶向树突状DNA。采纳 Western blot 及 RT-PCR 检测转染效率。b）甲基化靶向树突状 DNA 技术精品文档---下载后可任意编辑采纳具有甲基化靶向序列的树突状 DNA，能够靶向甲基化序列，并利用反式转录-聚合酶链反应(RT-PCR)进行检测。c）免疫印迹和定量 PCR采纳 Western blot 检测样本中 Dab2 的表达水平；采纳实时荧光定量 PCR 确定样本中 Dab2 的 mRNA 表达水平。d）细胞实验包括细胞增殖、迁移和侵袭能力的实验。四、预期结果通过本讨论，预期将获得 Dab2 在肺癌组织及细胞中的表达及甲基化水平，进一步探讨 Dab2 及 DNA 甲基化在肺癌中的作用机制。同时，本讨论也将有助于深化理解肺癌的分子机制，为肺癌的治疗与预防提供有效的科学依据。
