精品文档---下载后可任意编辑DNA 脱甲基化对整合至 rDNA 区外源基因 hFⅧ 表达量的影响的开题报告题目:DNA 脱甲基化对整合至 rDNA 区外源基因 hFⅧ 表达量的影响的讨论讨论背景:rDNA 区是真核生物中最重要的转录活跃区之一,也是外源基因整合和表达的热门区域之一。讨论表明,DNA 脱甲基化可以促进转录因子结合和基因表达。然而,对于整合在 rDNA 区的外源基因,DNA 脱甲基化对其表达量的影响尚未明确。讨论目的:本讨论旨在探究 DNA 脱甲基化对整合至 rDNA 区外源基因 hFⅧ 表达量的影响,并分析其可能的分子机制。讨论方法:本讨论将使用基因整合技术将 hFⅧ 基因整合到小鼠rDNA 区,然后应用 DNA 甲基转移酶抑制剂 5-Aza-CdR 实现 DNA 脱甲基化。接着,通过实时荧光定量 PCR 和 ELISA 等技术,分别检测hFⅧmRNA 和蛋白表达水平,并在分子水平上分析 DNA 脱甲基化是否影响 H3K4me3 和 RNA 聚合酶 II 在 rDNA 区定位。讨论意义:本讨论将为深化了解 DNA 脱甲基化在外源基因整合和表达中的作用提供重要数据,对于讨论转录调控机制、优化外源基因表达技术以及开发相关药物具有重要意义。