精品文档---下载后可任意编辑HSP22 对缺氧复氧损伤人脐静脉内皮细胞保护及其机制的开题报告一、讨论背景缺氧-复氧(hypoxia-reoxygenation,H/R)是一种普遍存在于各种疾病情况下的重要病理生理过程,如心肌梗死、脑卒中、创伤、感染等均可能引起此过程。缺氧-复氧可导致内皮细胞(endothelial cells,EC)受到严重损伤,从而引发血管病理性生理异常。热休克蛋白(heat shock protein,HSP)是细胞中具有抗压能力的重要分子,具有保护细胞免受不良环境压力的能力。其中,HSP22 是小分子热休克蛋白之一,具有抗氧化、抗凋亡和细胞重构等重要作用。二、讨论目的本讨论旨在探究 HSP22 在人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)中的保护作用,并讨论其作用机制。三、讨论内容1. 构建 H/R 模型采纳缺氧罐室 + 大气通气的方法使 HUVECs 模拟缺氧状态,之后使其恢复正常供氧,以模拟缺氧-复氧的病理生理环境。2. HSP22 干预通过细胞转染技术将 HSP22 的过表达载体转入 HUVECs,使得其能够高表达 HSP22;或者使用小分子化合物诱导 HUVECs 高表达HSP22。3. 检测 HSP22 对 HUVECs 的保护作用采纳 MTT 法、细胞存活率检测、细胞凋亡检测等方法,检测HSP22 的表达是否能够保护 HUVECs 的生存和减轻缺氧-复氧对其的损伤。4. 探究 HSP22 的抗氧化作用采纳 DCFH-DA 荧光探针、MDA 检测、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性等方法,检测 HSP22 是否能够降低 HUVECs 的氧化应激水平。精品文档---下载后可任意编辑5. 探究 HSP22 的细胞信号通路采纳 Western blotting 检测凋亡相关几种蛋白的表达水平,包括Bcl-2、Bax 等;同时,通过 phospho-kinase array 对 HUVECs 的信号通路进行讨论。四、讨论意义本讨论将为认识 HSP22 对血管内皮损伤的保护作用提供新的认识,并增进人们对于 H/R 状态下细胞生存和凋亡的认识。进一步讨论还可为探究 HSP22 在治疗心脑血管疾病方面的应用提供新思路。