精品文档---下载后可任意编辑mir-29b 在慢性粒细胞白血病细胞增殖及凋亡中的作用及其机制讨论的开题报告开题报告题目：mir-29b 在慢性粒细胞白血病细胞增殖及凋亡中的作用及其机制讨论一、讨论背景和意义慢性粒细胞白血病（chronic myeloid leukemia，CML）是一种由成熟的骨髓干细胞向肝脾（hepatosplenomegaly）转移和异常增殖所引起的恶性血液病。CML 主要是由染色体 Ph+的比例异常引起的，该染色体中的 bcr-abl 基因的融合导致 ABL-酪氨酸激酶的激活，进而促进细胞增殖和凋亡抵抗，从而导致 CML 细胞的异常增殖。CML 是一种难以治愈的癌症，虽然伊马替尼作为一种靶向药物可以控制白细胞的数字，但是治愈的比例极低，临床问题仍然很严重。在 CML 发病过程中，microRNA（miRNA）等非编码 RNA 基因参加了细胞增殖、凋亡、分化及肿瘤发生进展等生物学过程。miRNA 是一类短链（~22nt）的非编码 RNA，能够与靶 mRNA 特异性结合，起到下调 mRNA 的翻译和抑制其蛋白质细胞内水平的作用。其中，mir-29b是调节 CML 进展的非常重要的 miRNA，它能够下调 BCR-ABL 的表达，抑制癌细胞的增殖和提高凋亡率，是一个非常有潜力的治疗 CML 的激素。二、讨论目的和内容为了更深化了解 mir-29b 对 CML 细胞增殖和凋亡的作用及其机制，本讨论的目的是：1. 确定 mir-29b 的表达水平在 CML 细胞中的变化。2. 讨论 mir-29b 对 CML 细胞的增殖和凋亡的影响，并探究其作用机制。三、讨论方法1. 细胞培育和处理：采纳人 CML 干细胞系 K562、LAMA-84 和KU812 细胞系，在体外制备细胞悬液，使用外源性转染或使用 mir-29b-mimic 和-miR-NC-stable 转染进行处理。精品文档---下载后可任意编辑2. Real-time PCR 检测 mir-29b 的表达：提取细胞总 RNA，使用实时荧光定量 PCR 方法测定 mir-29b 的表达水平，并用 U6 RNA 作为内部参照。3. 克隆体条形码：利用 WST-1 细胞增殖试剂盒、染色体形态学分析、流式细胞术分析细胞增长情况。4. 流式细胞术：使用双荧光素酶分子探针，检测 miRNA 对白细胞凋亡率的影响。四、讨论意义通过本讨论的探究，可以更清楚的了解 mir-29b 在 CML 细胞中的作用机制，对治疗 CML 的讨论提供新的思路和策略。此外，本讨论也可以为 miRNAs 与其他肿瘤关联讨论提供新的视野和思路。
