精品文档---下载后可任意编辑NEDD9 在上皮卵巢癌恶性生物学行为中的作用及机制的初步讨论的开题报告一、选题背景和意义上皮卵巢癌是女性生殖系统常见的一种恶性肿瘤，其发病率和死亡率均居女性恶性肿瘤之首。目前，虽然针对上皮卵巢癌的治疗手段已经不断地得到进步，但是其治愈率并不高，主要因为其疾病机制及治疗耐药性尚未完全阐明。因此，深化了解上皮卵巢癌的发病机制以及相关信号通路的调控机制，对于指导疾病的临床治疗具有重要的意义。NEDD9(神经细胞迁移素血浆膜肽相关酪氨酸激酶底物 9)是一种新型的肿瘤相关蛋白，这种蛋白在多种肿瘤中常常出现异常表达，并且与肿瘤细胞的侵袭、转移及预后密切相关。近年来，有讨论表明 NEDD9在上皮卵巢癌中的表达呈现出明显的增加趋势。因此，本讨论旨在探究 NEDD9 在上皮卵巢癌中的作用及机制，为寻找新的治疗手段以及指导临床治疗提供理论支持。二、讨论内容和方法1. 讨论内容（1）分析上皮卵巢癌患者的 NEDD9 表达水平（2）构建 NEDD9 基因敲除和过表达的细胞系（3）细胞增殖和克隆形成实验（4）Transwell 实验（5）Western blot 检测细胞中相关信号通路的磷酸化水平变化2. 讨论方法（1）采纳实时荧光定量 PCR、免疫荧光染色、Western blot 等手段，分析人上皮卵巢癌病人和正常卵巢组织中 NEDD9 的表达水平及其与生存率之间的关系。（2）使用 CRISPR-Cas9 技术敲除细胞株内的 NEDD9 基因，并通过 cDNA 转染进行 NEDD9 蛋白的重组。（3）MTT 实验及克隆形成实验来比较不同细胞的细胞增殖能力以及克隆形成能力。精品文档---下载后可任意编辑（4）通过 Transwell 实验评估细胞迁移和入侵活性的差异。（5）使用 Western blot 技术来检测细胞系中信号通路相关蛋白及其在磷酸化水平上的变化。三、预期结果（1）NEDD9 在上皮卵巢癌中的表达水平明显高于正常卵巢组织。（2）通过 CRISPR-Cas9 技术敲除 NEDD9 基因和重组 NEDD9 蛋白的细胞系建立成功。（3）NEDD9 的敲除可抑制上皮卵巢癌细胞的增殖和克隆形成能力。（4）NEDD9 的敲除可抑制上皮卵巢癌细胞的迁移和入侵活性。（5）分析细胞系中相关信号通路的磷酸化水平变化，探讨 NEDD9在上皮卵巢癌中的作用机制。四、讨论意义本讨论通过临床病例分析和细胞实验检测手段，探究 NEDD9 在上皮卵巢癌恶性生物学行为中的作用及机制，阐明其在上皮卵巢癌发生进展过程中的作用，并为改善上皮卵巢癌的临床治疗提供理论指导。
