精品文档---下载后可任意编辑RNA 干扰技术讨论五氯酚 PCP 对 MCF-7 细胞类固醇激素相关基因表达的影响的开题报告开题报告一、选题背景五氯酚 PCP(Pentachlorophenol)是一种广泛应用于杀虫剂、防腐剂以及木材防腐剂等工业产品中的有毒物质
虽然 PCP 已经被禁用,但是仍然存在于一些地下水、土壤和废弃物中
五氯酚 PCP 对人体健康的危害性已经引起广泛关注
MCF-7 细胞是一种乳腺癌细胞,这种细胞对于女性内分泌激素的敏感性很高,因此被广泛用于乳腺癌药物筛选和激素相关讨论
本讨论旨在通过 RNA 干扰技术讨论 PCP 对 MCF-7 细胞类固醇激素相关基因表达的影响,从而深化了解 PCP 对于内分泌系统的干扰作用
二、讨论内容和方法1
讨论内容本讨论将通过 RNA 干扰技术讨论 PCP 对 MCF-7 细胞类固醇激素相关基因表达的影响
主要讨论内容包括:(1)确定 RNA 干扰对目标基因表达的影响
(2)逐一干扰类固醇激素相关基因的表达
(3)对 MCF-7 细胞进行 PCP 处理
(4)测定 MCF-7 细胞中类固醇激素相关基因的表达水平
讨论方法(1)构建靶向 siRNA 并检验 RNA 干扰的有效性
根据目标基因序列设计靶向 siRNA,转染到 MCF-7 细胞中
使用Real-Time PCR 和 Western Blot 等技术检验 RNA 干扰效果
(2)干扰类固醇激素相关基因的表达
逐一干扰类固醇激素相关基因的表达,并检验干扰效果
(3)对 MCF-7 细胞进行 PCP 处理
精品文档---下载后可任意编辑将 MCF-7 细胞分为对比组和实验组,对实验组进行不同浓度的 PCP处理
(4)测定 MCF-7 细胞中类固醇激素相关基因的表达水平
通过 Real-Time PCR、Western Blot 检测 MCF-7 细胞中类固醇