精品文档---下载后可任意编辑shRNA 沉默多药耐药胃癌细胞 7901VCR MDR1 基因表达的实验讨论的开题报告一、背景和意义多药耐药是肿瘤治疗中的一个主要问题。随着化疗药物的应用,多药耐药肿瘤的发生率越来越高。胃癌作为一种常见的消化道恶性肿瘤,也存在多药耐药的问题。在多药耐药胃癌细胞中,ABC 转运蛋白家族的MDR1 基因的过度表达被认为是一种重要的机制。因此,抑制 MDR1 基因的表达可以有效地逆转多药耐药胃癌细胞的耐药性。RNA 干扰技术是一种使用小分子 RNA 分子来靶向特定基因从而沉默其转录和/或翻译的方法,已经成为了讨论基因功能和疾病治疗的重要手段。因此,本讨论计划采纳 shRNA 沉默技术来下调 MDR1 基因表达,探究其对多药耐药胃癌细胞 7901VCR 耐药性的影响。二、讨论内容和方法本讨论计划采纳质粒载体转染的方法构建 shRNA 靶向 MDR1 基因的表达载体,并转染到多药耐药胃癌细胞 7901VCR 中。接着,通过qPCR 和 Western blot 等技术鉴定 shRNA 载体对 MDR1 基因的沉默效果,并利用 MTT 法评估 shRNA 对 7901VCR 细胞敏感性的影响。此外,我们还将观察 shRNA 是否会影响 7901VCR 细胞的凋亡和细胞周期的变化。三、预期结果本讨论预期能够构建出能够有效沉默 MDR1 基因表达的 shRNA 载体,并证实其对 7901VCR 细胞耐药性的明显影响。我们期望该讨论成果能够为探究多药耐药胃癌治疗的新策略提供实验依据。