精品文档---下载后可任意编辑Survivin 反义寡核苷酸对 K562 细胞耐药性的讨论的开题报告题目：Survivin 反义寡核苷酸对 K562 细胞耐药性的讨论一、讨论背景细胞耐药性是肿瘤化疗失败的一个主要原因。目前，针对肿瘤细胞耐药性的讨论日趋成熟，其中 Survivin 作为一种重要的抗凋亡蛋白，在抗肿瘤过程中发挥了关键的作用。Survivin 是一种含有BIR（Baculovirus IAP Repeat）结构域的蛋白，它可以结合Caspase3、Caspase7 等凋亡因子，从而抑制细胞凋亡。Survivin 在大多数癌细胞中高表达，并与肿瘤的恶性程度、患者预后相关。因此，治疗肿瘤时抑制 Survivin 表达是一种被普遍讨论的策略。二、讨论目的本讨论旨在探讨 Survivin 反义寡核苷酸对 K562 细胞的耐药性和生长抑制作用。三、讨论方法1.细胞株和培育条件：将 K562 细胞分别在 RPMI 1640 中加入10%的胎牛血清、100 μg/mL 的青霉素和 100 μg/mL 的链霉素，细胞密度为 10^5/mL， culturing at 37 ℃ in 5% CO2；2. Survivin siRNA 设计和合成：根据 Survivin mRNA 序列设计并合成 Survivin siRNA，经基因测序实验室验证；3. 细胞转染：通过脂质体法将 Survivin siRNA 转染至 K562 细胞中；4. Western blot：Western blot 沉淀 K562 细胞清液，运用Survivin，Bcl-2，Bax，Caspase3 等蛋白抗体进行 Western blot 分析和定量；5. CELLS Counting Kit-8（CCK-8）细胞活性检测，采纳 K562细胞，利用 CCK-8 检测几个时间点（12h、24h、48h）下细胞的生长状态；6. 流式细胞术分析： 采纳 Annexin V-FITC/PI 染料，分析 K562 细胞在 Survivin siRNA 转染下的凋亡情况。精品文档---下载后可任意编辑四、讨论预期本讨论将有效降低 Survivin 在 K562 细胞中的表达水平，从而观察Survivin 在肿瘤细胞中的生长抑制作用以及对肿瘤细胞的耐药性的影响。最终，估计可以为临床肿瘤治疗提供新的讨论和临床治疗思路。
