精品文档---下载后可任意编辑与 HSV-1UL47 相互作用的宿主细胞蛋白的筛选和鉴定的开题报告一、讨论背景和意义疱疹病毒（Herpes simplex virus，HSV）是一种具有极高传染性的病毒，其中 HSV-1 是引起人类病症最常见的一种。HSV-1 可引起多种疾病，包括口腔疱疹、角膜炎、脑炎等，严重危害着人类健康。目前对于口腔疱疹的治疗主要以靶向 Herpes simplex virus 酶的小分子抑制剂为主，但这些抑制剂存在副作用和易产生耐药性的问题。在 HSV 感染过程中，病毒与宿主细胞发生相互作用，从而成功入侵宿主细胞。众所周知，病毒生命历程中解剖及与宿主细胞中的许多蛋白质发生交互。发现并鉴定与 HSV 相互作用的宿主细胞蛋白能够为 HSV 疾病的讨论提供新思路，为探究 HSV 病理机制提供有益的技术手段。因此，通过筛选与 HSV-1UL47 相互作用的宿主细胞蛋白，可以深化探讨 HSV-1 与宿主细胞的相互作用机制，为 HSV 疾病的治疗和预防提供新的方向和思路。二、讨论方法和方案本讨论将利用蛋白质互作网络分析与高通量筛选技术，筛选与 HSV-1UL47 相互作用的宿主细胞蛋白。（1）构建 HSV-1UL47 酵母双杂交系统：利用 pGBKT7-UL47 驱动剪接体的表达和 pGADT7 筛选库靶向不同的细胞类型，进行筛选。（2）酵母表面展示技术：HSV-1UL47 宿主细胞蛋白在酵母表面进行展示，并通过对比筛选出与其相互作用的宿主细胞蛋白。（3）原位免疫共沉淀技术：利用重组蛋白做成免疫快速筛选列进行原位免疫共沉淀。（4）细胞捕获技术：结合切口和荧光激发，猎取细胞抓捕后的蛋白质复合物，对其中的蛋白质进行鉴定。三、讨论预期结果通过上述筛选技术，能够发现与 HSV-1UL47 相互作用的宿主细胞蛋白，并初步鉴定其功能。可为深化探究 HSV 病理机制和寻找治疗和预防 HSV 感染的新方法提供理论和实验依据。
