精品文档---下载后可任意编辑非小细胞肺癌淋巴管生成及慢病毒介导的 VEGF-C RNA 干扰实验讨论的开题报告一、讨论背景非小细胞肺癌(pNon-Small Cell Lung Cancer, NSCLC)是一种常见的恶性肿瘤，其高度侵袭和转移能力导致肺癌患者的死亡率居高不下。淋巴管生成(lymphangiogenesis)是恶性肿瘤转移的重要途径之一，促进淋巴管生成是抑制肺癌转移的一个重要策略。VEGF-C 是介导恶性肿瘤淋巴管生成的主要因子之一，因此，阻止 VEGF-C 的表达和功能有望成为抑制非小细胞肺癌转移的一种方法。RNA 干扰技术是一种利用 RNA 介导的方式特异性地抑制基因表达的技术，已被广泛应用于癌症治疗的前沿领域。慢病毒介导的 RNA 干扰技术(即慢病毒耗材)具有高效、持久、广谱和安全等优点，已被证明是一种合适的基因干扰技术。因此，本讨论拟通过慢病毒介导的 VEGF-C RNA 干扰技术探究 VEGF-C 对NSCLC 淋巴管生成的影响，为肺癌的治疗提供新的思路和方法。二、讨论目的本讨论的主要目的是通过慢病毒介导的 RNA 干扰技术抑制 VEGF-C 的表达和功能，进而探究 VEGF-C 在非小细胞肺癌淋巴管生成中的作用机制。三、讨论方法1. 菌株和质粒构建本实验所使用的慢病毒参考前人的方法，本文不再赘述。2. 慢病毒病毒包装和感染采纳三段式包装的方法获得慢病毒，筛选出表达斑马鱼 VEGF-C shRNA 的病毒，选取适当的 MOI 进行感染。3. 蛋白质印迹分析利用 Western blot 检测 VEGF-C 的表达情况，并比较感染组和对比组的差异。4. 细胞培育和 MTT 法检测细胞增殖采纳 NSCLC 细胞株 PC9 作为讨论对象，通过 MTT 法检测细胞增殖情况。5. 灌注法检测淋巴管生成通过灌注法检测 NSCLC 细胞在 nude 小鼠体内的淋巴管生成情况，观察 VEGF-C 的表达和功能对淋巴管生成的影响。四、讨论意义精品文档---下载后可任意编辑通过本讨论，可以探究 VEGF-C 在非小细胞肺癌淋巴管生成中的作用机制，并为肺癌的治疗提供新的思路和方法。此外，本讨论也为 RNA 干扰技术在肺癌治疗方面的应用提供了实验基础。
