实验六、抗菌药物的体外药效试验 （药敏试验） 各种病原菌对抗菌药物的敏感性不同，同种细菌的不同菌株对同一药物的敏感性有差异，检测细菌对抗菌药物的敏感性，可筛选最有疗效的药物，用于临床对控制细菌性传染病的流行至关重要。此外，通过药物敏感试验可为新抗菌药物的筛选提供依据。药敏试验的方法很多，普遍使用的有滤纸片扩散试验（Kirby-Baueer Dice Diffusion）；最低抑菌浓度试验（Minimum Inhibitory Concentration, MIC ） 和 最 低 杀 菌 浓 度 试 验（ Minimum Bactericidal Concentration, MBC）。 ［目的要求］ 1、熟悉体外抗菌试验操作技术。 2、掌握药物抗菌能力体外测定的常用方法及其用途。 ［实验原理］ 常用的体外测定药物抑菌能力的方法有两大类：琼脂渗透法与浓度系列稀释法。琼脂渗透法时利用药物能够渗透至琼脂培养基的性能，将实验菌混入琼脂培养基后倾注成平板；或将试验菌均匀涂于琼脂平板的表面，然后用不同的方法将药物置于已含试验菌的琼脂平板上。根据加药的操作方法不同而有滤纸片法、打洞法、管碟法及挖沟法等。经适宜温度培养后观察药物的抑菌能力。浓度系列稀释法时把药物稀释成不同的系列浓度，混入培养基内，加入一定量的试验菌，经适宜温度培养后观察结 果 ，求得 药物的最低抑菌浓度（MIC）。 1 、细菌：所 用细菌应 包 括 主 要致 病菌。革 兰 氏 阳 性球 菌包 括 金 黄 色 葡 萄 球菌(产 酶 与不产 酶 菌株)、表皮 葡 萄 球 菌，链 球 菌、肠 球 菌等。革 兰 氏 阴 性球 菌如淋 球 菌等。革 兰 氏 阴 性杆 菌包 括 流感杆 菌、肠 杆 菌科 细菌 8～ 10 种，绿 脓 杆 菌与其它 假 单 孢 菌属 及不动 杆 菌属 等，厌 氧 菌包 括 脆 弱 类杆 菌、消 化 球 菌和消 化 链 球菌等。对临床应 用有代 表性的菌株数 量，创 新药应 不小 于 1000 株。其它 类新药根据新药抗菌谱 宽 窄 可作 200-500 株。试验时应 包 括 有国 际 公 认 质 控菌株(如 金葡 菌 ATCC25925，大肠 杆 菌 ATCC25922 和绿 脓 杆 菌 ATCC27853 等)。 2 、培养基：选 MH(Mu elkr-Hintop)培养基。链 球 菌、流感杆 菌需 接 种到 巧 克力琼脂平板或加5％ 羊 血 。淋 球 菌接 种到 哥 伦 比 亚 培养基上。 3、 药 物 配 制 ： 试 验 样 品 与 阳 性 对 照...
