对化学性肝损伤有辅助保护作用检验方法四氯化碳模型酒精模型

对化学性肝损伤有辅助保护作用检验方法 1 原理 四氯化碳（CC14）受到肝微粒体酶活化成为三氯甲烷自由基（CC13·）与蛋白质共价结合导致蛋白合成障碍、脂质分解代谢紊乱，引起肝细胞内甘油三酯（TG）蓄积。CC13·也能迅速与 O2 结合转化为过氧化三氯甲烷自由基（CC13O2·）导致脂质过氧化，从而引起细胞膜的变性损伤，至使酶渗漏以及各种类型的细胞病变，甚至坏死。 2 实验动物 成年大鼠或小鼠，单一性别，大鼠 180-220 克，每组 8-12 只，小鼠 18-22 克，每组 10-15 只。 3 实验方法和步骤 3.1 剂量和分组 至少设三个剂量组，同时设空白对照组和模型对照组，必要时设溶剂对照组。按人体每日推荐量的 5-10 倍为中剂量（等效应剂量），下、下各设一个剂量组，最高剂量不得超过人体每日推荐量（以公斤计）的 30倍。用CC11（分析纯）造成肝损伤模型，小鼠 CC14 灌胃浓度为1%，以食用植物油稀释，灌胃量 5ml/kgBW，大鼠灌胃浓度为2-3%，灌胃量 5ml/kgBW（折 合 CC14 的剂量为160mg/kgBW）。 3.2 给 予 受试 样 品 的途 径 和时间 经 口 灌胃给 予 受试 样 品 ，无 法灌胃时将 受试 样 品 掺 入 饲 料 或饮 水 亦 可 ，并 记 录 每只动物的饲 料 摄 入 量或饮水 量。 3.3 实验步骤 每日经 口 灌胃给 予 受试 样 品 ，空白对照组和模型对照组给 予 蒸 馏 水 。将 动物每周 称 重 两 次 ，以调 整 受试 样品 剂量。于 实验第 30 天 将 各组动物隔 夜 禁 食16 小时，模型组及各样 品 组一次 灌胃给 予 CC14，空白对照组给 植物油，受试 组继 续 给 予 受试 样 品 至实验结束 （与 CC14 灌胃间 隔 4 小时以上 ）。给 予 CC14 后 ，根 据 实际 情 况 于 24 或 48 小时处 死动物，取 血 分离 血 清 ，测 定 ALT、AST、，并 取 肝脏 进 行 病理组织 学检测 。 3.4 检测 指 标 血 清 谷 丙 转氨 酶（ALT），谷 草 转氨 酶（AST），肝脏 病理组织 检查 4. 血 清 谷 丙 转氨 酶（ALT），谷 草 转氨 酶（AST）的测 定 ： 4.1 测 定 方法： 可 选 用全 自动生 化分析仪 或赖 氏 法（试 剂盒 ）测 定 。 4.2 数 据 处 理和结果 判 定 采 用方差 分析，但 需 按方差 分析的程 序 先 进 行 方差 齐 性检验，方差 齐 ，计算 F 值 ，F ...