《环境微生物新技术》课程作业 2
微生物数量测定方法有哪些
空气、水、土壤样品分别适用哪些方法
常见微生物数量的测定方法 1
计数器测定法: 即用血细胞计数器进行计数
取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内,用显微镜观察计数
由于计数室的容积是一定的(O
1mm3),因而根据计数器刻度内的细菌数,可计算样品中的含菌数
本法简便易行,可立即得出结果
本法不仅适于细菌计数,也适用于酵母菌及霉菌孢子计数
2、电子计数器计数法: 电子计数器的工作原理是测定小孔中液体的电阻变化,小孔仅能通过一个细胞,当一个细胞通过这个小孔时,电阻明显增加,形成一个脉冲,自动记录在电子记录装置上
该法测定结果较准确,但它只识别颗粒大小,而不能区分是否为细菌
因此,要求菌悬液中不含任何碎片
3、活细胞计数法 : 常用的有平板菌落计数法,是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的
取一定容量的菌悬液,作一系列的倍 比 稀 释 ,然 后 将定量的稀 释 液进行平板培 养 ,根据培 养 出的菌落数,可算出活菌数
此法灵敏度高,是一种检测污染活菌数的方法,也是目前国际上许多国家所采用的方法
使用该法应注意:①一般选取菌落数在 30~300 之间的平板进行计数,过多或过少均不准确;②为了防止菌落蔓延,影响计数,可在培养基中加入 O.001%2,3,5 一氯化三苯基四氮唑(TTC);③本法限用于形成菌落的微生物
广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验,是最常用的活菌计数法
4、比浊法 比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量
细菌悬浮液的浓度在一定范围内与透光度成反比,与光密度成正比,所以,可用光电比色计测定菌液,用光密度(OD 值)表示样品菌液浓度
此法简便快捷,但只能检测含有大量细菌的悬浮液,得出相对的细菌数目,对颜色太深的样品,不能用此法测定