抗原的制备方法 除完整的细胞可作为抗原外,各种不同的细胞内存在的各种分子量不同的物质,也都具有全抗原或半抗原的性质,某种抗原物质可能是某一类细胞所特有的,可作为这种细胞的一个标志。由于细胞存在着许多性质不同的抗原物质,有时要从这众多的物质中提取、纯化某种抗原物质,以供科学研究之用。 一、抗原的提取 抗原的制备是一件十分细致的工作,要制备一个高纯度的抗原,需要付出艰巨的努力,制备工作涉及物理学、化学和生理学等许多领域的知识。根据物理或化学特性建立起来的分离、纯化方法的主要原理不外乎科二个方面:①利用混合物中几个组分分配率的差别将他们分配到可用机械方法分离的两或几个物相中,如盐析、有机溶剂抽提、层析和结晶等;②把混合物置于单一物相中,通过物理力场的作用使各组分分配于不同的区域而达到分离的目的,如电泳、超速离心和超滤等。由于组织细胞内存着许多分子结构和理化性质不同的抗原物质,其分离方法也不一样,就是同一类大分子物质,因选 材 不同,所使用的方法也很 大差别。因此 很 难 有一个通用的标准 方法供提取任 何 生物活 性物质使用,所以在提取前 必须 针 对 所欲 提取的物质,充 分查 阅 文 献 资 料 ,选 用合适 的方法。如果 要提取一个结构及性质未 知的抗原物质,更 需要经 过各种方法的比 较 探 索 ,才 能找 到一些 工作规 律 和获 得 预 期 的效 果 。 抗原物质的制备,大概 要经 过如下 过程 :①材 料 的选 择 和预 处 理;②细胞的粉 碎 ( 细胞器 的分离) 。③ 提取;④ 纯化;⑤ 浓 缩 或干 燥 ,保 存。现 分别简 述 如下 。 ( 一) 材 料 的选 择 及预 处 理 选 择 什 么 材 料 主要根据实 验 目的而定 。通常 选 含 量高、工艺 简 便 、成 本 低 的材 料 。材 料 选 定 后 ,通常 要进 行 预 处 理,剔 除结缔 组织、脂 肪 组织等,把组织块剪 碎 。若 取材 后 不立即 进 行 提取,则 应 冷 冻 保 存,动 物组织更 要深 低 温 保 存。某些 容 易 失 活 的物质,一般 宜 采 用新 鲜 材 料 。 ( 二) 细胞的粉 碎 除了 提取体 液 、组织间 液 内的多肽 、蛋 白 质、酶 不需粉 碎 细胞外,凡 要提取组织内、细胞膜 上 及胞内的生物活 性物质,都必 须 把组织和细胞粉 碎 ,使活 性物质...