反 相 色 谱 是 迄 今 在 高 效 液 相 色 谱 中 应 用 最 广 泛 的 技 术 ，主 要 是 因 为 它 适 用 于 分 析极 大 多 数 的 非 极 性 物 质 和 很 多 的 可 离 子 化 的 及 离 子 化 合 物 。大 多 数 用 于 反 相 色 谱的 固 定 相 都 是 天 然 的 疏 水 物 质 ， 因 此 ， 分 析 物 是 按 照 它 们 与 固 定 相 的 疏 水 相 互 作用 的 大 小 来 分 离 的 ， 含 有 疏 水 的 机 制 也 能 以 同 样 的 保 留 方 式 分 离 。 固 定 相 上 还 有 少 数 物 质 ， 如 混 合 相 （ 例 如 苯 基 － 己 基 ） 、末端封闭和 非 末端封闭种类和 极 性 嵌入相 － 也 存在 于 这些键合 硅胶上 。 还 有 很 多 填料用 于 反 相 色谱 ， 包括聚合 物 ， 聚合 物 表面涂上 硅胶和 氧化 铝， 无机 － 有 机 混 合 物 ， 涂层氧化锆， 和 石墨化 碳。 不同 种类的 固 定 相 有 他们 自己 的 优点和 缺点。 反 相 色 谱 柱利用 各种流动相 和 添加物 可 以 有 很 多 的 应 用 。 一些技 术 利用 添加物 可 以 改变或修饰填料的 表面。 有 时候这些添加物 有 可 能 会污染键合 相 表面。 硅胶表面因 为 有 着疏 水 键合 相 而有 一些别的 化 学性 质 。 残留 的 硅烷醇存在 于所有 的 硅胶键合 填料中 。 这些硅烷醇具有 弱酸性 ， 因 此 能 与 某些待分 析 物 合 基 质成分 ， 特别是 碱性 成分 。 因 为 硅烷醇的pKa 值大 约是 4.5， 离 子 化 能 在 中 性 pH条件下发生因 此 与 阳离 子 产生静电相 互 作 用 就有 可 能 发生。 较老的 A 型硅胶能容纳高 浓度金属离 子 （ 有 时候 100ppm 或更多 ） ， 而这能 使硅胶表面的 酸性 更大甚至能 发生金属鳌合 现象或清除一些化 合 物 。 残留 硅烷醇在 非 末端封闭的 硅胶合短链键合 相 如 C2 或 C4 上 更让人烦恼。 使用 者必须清楚他们 所用 的 固 定 相 表面特殊性 质 和 可 能 的 分 析 物 － 固 定 相 表面的 相 互 作 用 ， 这样 当他们 使用 反 相 方 法时才能 考虑到可 能 的 基 质 相 互 作 用 。...
