植物总DNA 的提取 一 、 原 理 细 胞 中 DNA 主 要 存 在 于 细 胞 核 内 ， 称 为 核 DNA 或 染 色 体 DNA， 也 有 人 称 之 为 基 因 组DNA(genomic DNA)， 严 格 地 讲 ， 基 因 组 DNA 是 指 单 倍 体 细 胞 核 DNA。 细 胞 质 中 含 有 少 量的DNA， 称 为 核 外DNA 或 核 外 基 因 。 主 要 分 布 在 线 粒 体 及 叶 绿 体 内 ， 分 别 称 为 线 粒 体DNA(mtDNA)及 叶 绿 体 DNA(ctDNA)。 细 胞 内 各 种 DNA 总 称 为 总 DNA(total DNA)。 根 据 实 验 需 要 可 分 别 提 取 不 同 的DNA。 植 物 核DNA 的 提 取 主 要 用 于 基 因 文 库 构 建 、PCR 分 析 及 Southern 杂 交 ， 也 可 以 提 取 总 DNA 进 行 Southern 杂 交 。 核 DNA 分 子 呈 极 不 对称 的 线 状 结 构 ， 一 条 染 色 体 为 一 个DNA 分 子 。 高 等 植 物 核 DNA 的 分 子 量 为 1012 左 右 ， 约含 有 109bp， 就 其 长 度 与 直 径 的 比 例 而 言 ， 是 一 个 极 不 对 称 的 分 子 。 如 此 细 长 的 分 子 对 任 何机 械 力 的 作 用 都 十 分 敏 感 ， 虽 然 现 在 已 能 够 成 功 地 测 定 出 它 的 一 级 结 构 ， 但 到 目前为 止， 仍无法分 离纯化出 它 的 完整分 子 。 在 分 离纯化过程中 ， DNA 分 子 的 降解是 很难避免的 。 因 而分 离纯化所得到 的 只不 过是 植 物 核 DNA 分 子 的 片段。 采用 不 同 的 分 离方法， 所得的 片段大小有 所不 同 。 用 于 Southern 杂 交 的 植 物 DNA 样品在 长 度 上应不 小于 50Kb。 线 粒 体 DNA 及叶 绿 体 DNA 的 分 子 要 小得多， 分 子 量 约 为 107， 而 且为 环状 结 构 ， 因 此 完整的 线 粒 体 DNA及 叶 绿 体 DNA 的 分 离并不 十 分 困难， 现 已 有 许多报道。 核 DNA、 线 粒 体 DNA、 叶 绿 体 DNA的 提 取 一 般是 先分 离出 细 胞 核 及 细 胞 器， 然 后再提 取DNA。 总DNA 的 提 取 不 必分 离细 胞核 及 细 胞 器， 用 温和的 方法使细...
