从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序一、目的本程序用于对从业人员健康体检进行沙门氏菌、志贺氏菌检测等致病菌检测的方法，以规范操作程序，保证检测数据的有效性。二、适用范围：本方法适用于从人体粪便中沙沙门氏菌、志贺氏菌的分离、鉴定及保存的梯相关操作。三、生物安全要求标本及相应的致病菌操作必须在 BSL-2 生物安全实验室的生物安全柜中进行。四、试剂及仪器设备试剂采便盒、Cary-Blair 运送培养基、亚硒酸增菌液（SF）、改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤（SBG）、沙门志贺培养液、木糖-赖氨酸-脱氧胆酸琼脂（XLD）、麦康凯琼脂、沙门显色培养基、结晶紫沙门培养基（YS）、三糖铁（TSI）、动力-吲哚-尿素培养基（MIU）、沙门氏菌属诊断血清、志贺氏菌属诊断血清、API20E 生化试剂条、磁珠菌种保存管仪器设备恒温培养箱、微生物鉴定仪五、采样方法标本应为新鲜的或转移至 Cary-Blair 运送培养基的粪便或肛拭子，最优标本是转移到 Cary-Blair 运送培养基的粪便拭子。肛拭子不是最佳标本，仅在病人无粪便标本时采用。粪便标本：应采集自然排出的新鲜粪便，取稀水样、粘血样、脓血样，黏液样部分。盛于清洁、干燥、无吸水性的无菌容器，避免混入尿液、水和其他物质。肛拭标本：若无法获得粪便（如排便困难或婴幼儿），也可以采用肛拭子，即无菌棉拭子用生理盐水湿润后，插入肛门内 4-5cm 处〈儿童约 2-3cm），同一方向轻轻旋转 2-3 周。以目测能见到粪便为准。插入 Cary-Blair 运送培养基。标本采集后立即送至实验室进行检测，若室温保存，不能超过 1h；如不能立即送检，应放入 Cary-Blair 运送培养基中冷藏条件下 24 小时内送检。六、检验程序七、操作步骤分别标记一个 XLD 平板（或 YS 平板、麦康凯平板）和 1 管 9ml 改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤（SBG）（或 SF 增菌液或沙门志贺培养液）。用 1 个无菌拭子取少量标本（不要使拭子粘得太多，尽量从可见血或黏液的部位收集）接种在 XLD 平板的第一区，接着把拭子放入SBG 增菌液。再灭菌接种环在 XLD 平板的其余区进行划线接种。如果是 Cary-Blair 运送培养基的粪便拭子，则轻搅混合标本后接种增菌液与平板。所有培养基均放入 36°C±1°C 培养，SBG 的最佳增菌时间是 16〜18h（建议每天下午 4~5 时接种标本，第二天早上 8~10 时用增菌液划平板）。观察平板：取培养后的平板，观察有无可疑菌落。7.4.1 XLD 平板可疑菌落观察：志贺菌在...
