(完整)CFX 荧光定量 PCR 仪操作指南(Bio-rad)CFX96 实时荧光定量 PCR 仪操作流程及注意事项开始运行仪器打开电脑打开定量 PCR 仪底座开关启动 CFXManager 软件放置样品将 PCR 反应体系加入到 0
2ml 低缘八联管,盖上管盖;或加入低缘 96 孔板,用光学级封膜封好
注意,必须带一次性塑料手套,不要让手指接触到反应管表面
将反应管按顺序放入仪器的加热孔中
设置程序,运行实验定量 PCR 软件操作基本步骤为:a
设置热循环程序文件(ProtocolTab)b
设置反应板文件(PlateTab)
点击“StartRun"键,运行程序热循环程序文件(ProtocolTab)设置指南:点击 Edit(编辑)或 CreateNew(创建新程序)
反应板设置文件(PlateTab)设置指南:选择本次实验所要使用的荧光染料种类;单击样品类型;如要某些反应孔第一荧光染料对应的样品类型为标准品(Standard),点击“DilutionSeries”键可设置其标准品浓度及稀释倍数
点击“StartRun"键
单击 openlid(打开热盖)或 Closelid(关闭热盖)放置样品;单击 StartRun,保存文件,开始运行程序
结果分析PCR 反应结束后,软件会自动计算标准曲线和 Ct 值等
如需进行表达量分析、等位基因分析等,在软件窗口选择相应分析功能
点击右上方的“Report”键,还可输出结果报告单关闭运行仪器实验结束后取出反应管,顺序关闭 CFXManager 软件、定量 PCR 仪电源,关闭电脑
CFX 仪器上盖部分为全自动控制,在通电状态,严禁任何人为干涉上盖开启或关闭的行为,此类行为会导致上盖故障,危及仪器使用
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点击 InsertStep 在程序中增加一个温度步骤