(完整)CFX 荧光定量 PCR 仪操作指南(Bio-rad)CFX96 实时荧光定量 PCR 仪操作流程及注意事项开始运行仪器打开电脑打开定量 PCR 仪底座开关启动 CFXManager 软件放置样品将 PCR 反应体系加入到 0.2ml 低缘八联管,盖上管盖;或加入低缘 96 孔板,用光学级封膜封好。注意,必须带一次性塑料手套,不要让手指接触到反应管表面。将反应管按顺序放入仪器的加热孔中.设置程序,运行实验定量 PCR 软件操作基本步骤为:a。设置热循环程序文件(ProtocolTab)b。设置反应板文件(PlateTab).C.点击“StartRun"键,运行程序热循环程序文件(ProtocolTab)设置指南:点击 Edit(编辑)或 CreateNew(创建新程序).反应板设置文件(PlateTab)设置指南:选择本次实验所要使用的荧光染料种类;单击样品类型;如要某些反应孔第一荧光染料对应的样品类型为标准品(Standard),点击“DilutionSeries”键可设置其标准品浓度及稀释倍数。点击“StartRun"键。单击 openlid(打开热盖)或 Closelid(关闭热盖)放置样品;单击 StartRun,保存文件,开始运行程序。结果分析PCR 反应结束后,软件会自动计算标准曲线和 Ct 值等。如需进行表达量分析、等位基因分析等,在软件窗口选择相应分析功能。点击右上方的“Report”键,还可输出结果报告单关闭运行仪器实验结束后取出反应管,顺序关闭 CFXManager 软件、定量 PCR 仪电源,关闭电脑。注意!CFX 仪器上盖部分为全自动控制,在通电状态,严禁任何人为干涉上盖开启或关闭的行为,此类行为会导致上盖故障,危及仪器使用。(完整)CFX 荧光定量 PCR 仪操作指南(Bio-rad)2.点击 InsertStep 在程序中增加一个温度步骤。点击 DeleteStep 在程序中删除选中的步骤.(完整)CFX 荧光定量 PCR 仪操作指南(Bio-rad)itKE3/55r55.Rang1C.3.点击 AddPlateReadtoStep,在程序中指定获取荧光数据的时间。如果当前的高亮显示步骤已经进行了读板设置,则这一选项变为 RemovePlateRead•如果在这一步不想获取数据,则点击 RemovePlateRead.4.点击 GOT0 步骤的重复次数,改变程序中的循环次数,图 2 第 4 步。点击 GOT0 步骤数可改变 GOT0 循环中所包含的步骤.增加一个梯度步骤:1. 在程序编辑控制窗口中,点击 InsertGradient,图 2.2. 对梯度中最低和最高温度值进行编辑,在图形模式,文本模式下或出现在文本模式右侧的梯度范围计算器中直接点击数值进行编辑,图 3.ENC3...