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色谱柱的分类及特点

色谱柱的分类及特点_第1页
色谱柱的分类及特点_第2页
色谱柱的分类及特点_第3页
3-1 柱的结构 1、堵棒(或导管)2、接头 3、接头 4、密封圈 5、螺帽 6、柱密封圈 7、柱管 8、柱填料 9 10、过滤片 3-2 柱的分类: 根据所有的担体材料分为三种: a.硅胶型:机械强度高,易制成小颗粒,理论塔板数高。 b.聚全物型:在广泛的PH 值范围内稳定 c.羟基磷灰石型:对蛋白质等生物高分子样品有特殊的选择性。 根据分离方式分类: a.硅胶型 1) 正相:SIL--磷脂、NH--糖、维生素 E,CN--甾类激素。 2) 反相:ODS(C18)、(C8 CN TMS Phen y 1)低分子量化全物。 3) 离子交换: WAX(弱碱阴离子交换)--核苷酸、蛋白质 WCX(弱酸阳离子交换)--蛋白质 SAX(强碱阴离子交换)--核苷酸 SCX(强酸阳离子交换)--儿茶酚胶 4)凝胶过滤: Dio l--蛋白质 GF--蛋白质 b.聚合物型: 1)反相:ODP--50--肽,蛋白质,低分化合物。 2)离子交换:ISC--氨基酸,胍类化合物,ISA--糖,IC--无机离子,PA--蛋白质,ES--蛋白质。 3)配位交换:SCR(磺化聚苯乙烯)--糖。 4)离子排阻:SCR-101H 102H--有机酸 5)凝胶过滤:ION--多糖 GS--水溶性分子 6)凝胶渗透色谱(GPC):GPD--合成分子、橡胶。 7)羟基磷灰石型:HPC--蛋白质、核苷酸 按尺寸分类: 1.制备:30mm 50mm 内径,半制备:20mm 内径。 2.分析:标准型柱:4_8mm 内径。 快速色谱柱:3mm 内径、5cm 长、4.6mm 内径。 小孔径柱:2.5mm 内径,微孔径柱 1mm 内径。 3-3 柱的技术指标 *耐压:不小于 40Mpa。 *渗透性:反相--流动相甲醇1ml/min,压力 3Mpa。 正相--正乙烷1ml/min,压力3Mpa. *柱效:理论塔板极数>3x103。 *对称柱:葸峰不对称因子AS 在0.8~2.0 范围内。 *外观:光洁、标牌、尺寸、填充剂、流动相方向、日期等。 ODS 柱 ODS(C18)色谱柱是将十八烷基键合在担体的表面,然后填充的柱,在HPLC 中应用广。在HPLC 中反相色谱的引用占 70%,其中极大部分 使用的是 ODS(C18)。本公司所附的柱也是 ODS(C18)柱,内径4.6mm,长度 150mm。 一般反相色谱系统,流动相为极性溶剂,如水、甲醇、乙腈,非极性固定相,如十八烷基。反相系统简单,重复性好,柱子能长期稳 定工作,能完成分离、分析任务的 6 0 -8 0 %,所以分析工作者使用得最多的是反相柱。 柱的使用和维护 由于柱的质量直接影响到样品组分得分离情况,组分的定性,定量分析...

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