食品中蛋白质的测定

食品中蛋白质的测定1 实验目的本实验目的学习凯氏定氮法测定蛋白质的原理，掌握凯氏定氮法的操作技术，包括样品的消化处理，蒸馏、滴定及蛋白质的含量计算等。2 实验材料2.1 本实验所用材料肉松出处：广东海洋大学商店 2.2 实验日期以及当天气温情况实验日期：2020 年 10 月 29 日，气温：26°C3 实验方法本实验所用方法凯氏定氮法3.1 实验原理本实验原理是蛋白质是含氮的化合物，食品与浓硫酸和催化剂共同加热消化，使蛋白质分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵，留在消化液中，然后加碱蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后，再用盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以蛋白质换算系数，即得蛋白质含量。因为食品中除蛋白质外，还含有其他含氮物质，所以此蛋白质称为粗蛋白。3.2 试剂①硫酸铜②硫酸钾③ 硫酸(P 为 1.8419g/L)④ 硼酸溶液(20g/L)⑤ 氢氧化钠溶液(400g/L)⑥0.01mol/L 盐酸标准溶液⑦ 混合指示剂3.3 仪器微量定氮蒸馏装置，烧杯，锥形瓶，滴定管。图一微量定氮装置图二锥形瓶、烧杯等玻璃仪器图三微量定氮装置3.4 操作步骤① 样品消化称取 0.5g 肉松，移入干燥的 lOOmL 凯氏烧瓶中，加入 0.3g 硫酸铜和 6g 硫酸钾，加入 20mL 浓硫酸，将瓶以 45 度角斜支于有小孔的石棉网上，使用万用电炉，在通风橱中加热消化，开始使用低温加热，待内容物全部碳化，泡沫停止后，再升高温度保持微沸,消化至液体呈蓝绿色澄清透明后，继续加热 0.5h，取下放冷，小心加 20mL 水，放冷后,无损的转移到 100mL 容量瓶中，加水定容至刻度，混匀备用，即为消化液。② 定氮装置的检查与洗涤检查微量定氮装置是否装好:在蒸气发生瓶内装水约 2/3,加甲基红指示剂数滴及数毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入数粒玻璃珠，以防止暴沸。测定前定氮装置如下法洗涤 2〜3 次：从样品进入口加水适量，通入蒸汽煮沸，产生项消耗盐酸标液体积 V1/mL 第一次第二第三11.11.11.的蒸汽冲洗冷凝管，数分钟后关闭夹子a,使反管中的废液倒吸留到反应室外层，打开夹子b 由橡皮管排出，如此数次，即可使用。③ 碱化蒸馏量取硼酸试剂 20mL 于锥形瓶，加入混合指示剂 2~3 滴，并使冷凝管的下端插入硼酸液面下，在螺旋夹 a 关闭、螺旋夹 b 开启的状态下，准确吸取 1OmL 样品消化液，由小漏斗流入反应室，并以 10mL 蒸馏水洗涤进样口流入反应室，塞紧棒状玻璃塞。将 10mL 氢氧化钠溶液倒入小玻杯，提起玻璃塞，使其缓缓流入反应室，用...