水质粪大肠菌群操作注意事项-作业指导书1

水质粪大肠菌群的测定 多管发酵法作业指导书 本试验基本操作参照《HJ/T 347—-2024 水质粪大肠菌群的测定 多管发酵法和滤膜法（试行)》制定此作业指导书.1.培育基、试剂与仪器 本标准所用试剂除另有注明外,均为符合国家标准的分析纯化学试剂；实验用水为新制备的去离子水；操作者必须建立“无菌概念”和掌握“无菌操作技术"，所有涉及微生物操作的器皿必须进行灭菌，试验中避开所有可能造成微生物污染的操作。 单倍乳糖蛋白胨培育液：称取 23.0g 乳糖蛋白胨培育基于 1L 蒸馏水中，加热煮沸至完全，分装于含有倒置的玻璃倒管（杜氏小管)的 20x200mm 试管中，每试管 10ml（注意玻璃倒管中不能有气泡，若出现气泡，可用手指轻弹玻璃管）塞紧塞子，置于高压蒸汽灭菌器中，在 115℃灭菌 20min,贮存于暗处备用。 三倍乳糖蛋白胨培育液:称取 69。0g 乳糖蛋白胨培育基于 1L 蒸馏水中(注意煮沸步骤可能糊底,也可用二倍乳糖蛋白胨培育液替代）,其它操作同上。 EC 培育液：称取 37。0gEC 肉汤于 1L 蒸馏水中，加热煮沸至完全，分装于含有倒置的小玻璃管的试管中,每管 10ml（操作方法同单倍乳糖蛋白胨营养液）,于高压蒸汽灭菌器中，在 115℃灭菌20min，贮存于暗处备用。 伊红美蓝培育基：称取 36。0g 伊红美蓝培育基于 1L 蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解后，分装于三角烧瓶中。于高压蒸汽灭菌器中，在 121℃灭菌 15min,贮存于暗处备用。 生理盐水：在烧杯中配制适量的质量分数为 0。9%的生理盐水，分装于试管中，每试管 9.5mL,于高压蒸汽灭菌器中,在 121℃灭菌 15min，贮存于暗处备用。（本实验室中灭菌锅蒸发量为 0。5mL） 培育基的存放 :在密封瓶中的脱水培育基成品要存放在大气湿度低、温度低于 30℃的暗处,存放时应避开阳光直接照射，并且要避开杂菌侵入和液体蒸发。当培育液颜色变化，或体积变化明显时废弃不用。本实验室将培育基放置在 4℃冰箱中保存。 实验所需仪器 :超净工作台（有条件的实验室建议使用生物安全柜）、恒温培育箱、高压蒸汽灭菌器、冰箱、酒精灯、天平、电炉、500mL 广口瓶、烧杯、玻璃棒、玻璃发酵管、试管架、移液管、移液枪、接种环等，详见附件.2。试验前期准备 器皿灭菌（高压蒸汽灭菌）:所用采集水样的广口玻璃瓶、玻璃试管、移液管、玻璃棒、移液枪枪xxxxx 环境检测有限公司第 1 版 第 0 次修改 作业指导书编制人： 批准人: 批准发布日期:标题：水质 粪大肠菌群的测...