生物化学与分子生物学进展(基础)概论、目的基因分子克隆的载体核酸序列分析聚合酶链反应(自学)分子克隆技术常用的工具酶(自学)肿瘤转移的分子机制新生血管讨论与转化医学细胞周期与细胞增殖基因打靶的设计与实现细胞分化的分子机制医学系统生物学和蛋白质组学细胞信号转导一、1
操纵子那张图以乳糖操纵子为例,其组成:大肠杆菌乳糖操纵子含 Z、Y、A 三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰转移酶,此外还有一个操纵序列 O,一个启动子 P 和一个调节基因 I存在诱导物(乳糖)时,mRNA 得到转录;不存在诱导物时,mRNA 无法转录
(1)阻遏蛋白的负性调节:没有乳糖存在时,I 基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列 O 处,乳糖操纵子处于阻遏状态,不能合成分解乳糖的三种酶;有乳糖存在时,乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构,不能结合于操纵序列,乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶
(2)CAP 的正性调节:在启动子上游有 CAP 结合位点,当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时,cAMP 浓度升高,与 CAP 结合,使 CAP 发生变构,CAP 结合于乳糖操纵子启动序列附近的 CAP 结合位点,激活 RNA 聚合酶活性,促进结构基因转录,调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录,对乳糖操纵子实行正调控,加速合成分解乳糖的三种酶
概念(1)基因诊断:利用分子生物学技术,通过检测基因及基因表达产物的存在状态,对人体疾病作出诊断的方法
基因诊断检测的目标分子是 DNA、RNA,也可以是蛋白质或者多肽
(2)基因治疗:指将目的基因通过基因转移技术(病毒载体介导或者非病毒载体介导的基因转移技术)导入靶细胞内,目的基因表达产物对疾病起治疗作用
包括直接导入外源正常基因、采纳适当的技术抑制细胞内过度表达的基因、将特定的基因导入非病变细胞等
(3)pBR322:大小为 4