生物多肽工艺流程一、固相肽合成 （1)投料：树脂加入固相合成仪，加入 DCM 溶胀，抽干后加入 DMF 洗涤,洗涤结束抽干备用。 (2)缩合:将氨基酸用一定体积的 DMF 溶解，加入缩合剂活化后投入固相合成仪，补充 DMF 至反应浓度，搅拌反应。 (3)脱除保护基：以 Kaiser 试剂检测反应程度，反应结束后抽干溶剂，DMF 洗涤，加入 PIP/DMF 溶液脱除保护基，以 Kaiser 试剂检测反应程度,反应完毕抽干溶剂,DMF 洗涤，准备加入下一个氨基酸。 (4）缩合循环:根据树脂序列依次连接氨基酸，根据“脱保护——洗涤-—活化氨基酸——投料缩合——洗涤”步骤进行缩合循环操作，根据氨基酸序列完成剩余 n 个氨基酸的缩合。 （5）出料：合成结束之后用 IPA 和 DCM 交叉洗涤树脂,完成树脂收缩收缩，出料至不锈钢托盘. (6)树脂干燥：树脂在真空干燥箱中室温干燥,干燥完毕称重，计算收率。 （7）有机废液回收，集中处理. （8）清场：操作结束后操作人员及时清场。 二、树脂裂解 （1)配液:根据裂解液成分比例配置裂解液,并提前置冰柜中冷藏保存。 （2)投料：肽树脂加入反应釜中,加入预冷的裂解液，搅拌反应。 (3）出料：裂解结束后放出反应液，抽滤除去树脂并以 TFA 洗涤。 （4)浓缩：裂解液转入旋转蒸发仪室温浓缩至小体积。 (5）析出：浓缩后的反应液倾入预冷的甲基叔丁基醚(简称醚)中，搅拌使析出大量固体. (6）离心：浊液离心,并用预冷的醚洗涤。 （7）粗肽干燥：涤完成的粗肽转至真空干燥箱中室温干燥。 （8）有机废液回收，集中处理. (9）清场:操作结束后操作人员及时清场. 三、多肽 HPLC 纯化 (1)溶解：操作人员将粗肽溶解,调节 PH 至工艺规定范围。 （2)过滤：滤去粗肽溶液中不溶物,过滤 ACN 和纯化水。 （3)配制纯化液:根据工艺内容配制 A 相(乙腈)和 B 相(水）. （4）纯化：在制备型液相上进行纯化，分别接收流份。 (5)检验及返工：对制备流份进行检查,合并合格流份，其他部分根据需要再次纯化。 （6)废弃流动相按有机废液回收，集中处理. 四、浓缩过滤冻干 （ 1) 浓 缩 : 合 并 滤 液 旋 蒸 除 去 有 机 溶 剂 ， 有 机 废 液 回 收 ， 集中处理。 (2）过滤：浓缩后水相无菌过滤。 (3)冻干：滤液置冻干机中，设定升温程序冻干。 （4）出箱:出料、加内包.五、质量检查、入库工艺流程图如下所示.
