1.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生定向迁移(与其本身所带电荷相反的电极移动)的现象。利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫做电泳技术。2.生物大分子在电场中移动的速度由什么决定?答:样品性质方面:粒子大小,形状,带电荷多少,带电性质;电泳条件方面:介质阻力,电场强度,溶液黏度。3.粒子的移动速度(泳动速度 V)与电场强度(E)、粒子所带电荷量(Q)成正比,而与粒子半径(r)及溶液粘度(η)成反比。非球形分子(如线状 DNA)在电泳过程中受到更大的阻力,即粒子的泳动速度与粒子形状有关.4.迁移率与下列( D )因素无关?A。电荷数量 B。粒子大小 C。溶液黏度 D.电场强度电泳迁移率(/泳动度/淌度)μ:带电颗粒在单位电场强度下的移动速度。μ = V/E = Q/6πrη 【影响迁移率的因素:1. 待分离大分子的性质 :所带的电荷、分子大小和形状,分子带的电荷量越大、直径越小、形状越接近球形,则其电泳迁移速度越快;2。 缓冲液 pH 和离子强度:pH 值距 pI 愈远,Q 越大,V 越大 ;pH 过高或过低蛋白变性☞缓冲液☞;缓冲液通常要保持一定的离子强度;离子强度过低或过高的不利影响;3。 电场强度:E 高,带电颗粒泳动快。过高,产生焦耳热,样品和 Buffer 扩散增加,条带增宽;蛋白变性.过低,电泳时间增加,扩散。当需要增大电场强度以缩短电泳时间时,需附有冷却装置;4。 电渗 :在 电场中液体对固体支持物的相对移动;当电渗方向与电泳方向一致时,会加快颗粒泳动速度,反之,当两者方向相反时,会减慢颗粒泳动速度;5. 支持介质:筛孔越小,则颗粒在移动的过程中所受到的阻力也就越大;介质的纯度影响聚焦效果;介质的非特异性吸附会增大电渗。】5.等电点的定义?蛋白质在等电点时有哪些特点? 答:当溶液的 pH 为一定数值时,其中的蛋白质正负电荷相等,即净电荷为零,此时的 pH 值就是该蛋白质等电点 pI。蛋白质在等电点时的溶解度最小。6.下列不是区带电泳的是( C )A.纸电泳 B.醋酸纤维素薄膜电泳 C. 等电聚焦电泳 D.聚丙烯酰胺凝胶电泳7.等电聚焦与等速电泳的差别?答:区带窄,分辨率高。自由界面电泳:部分分离 8.电渗现象:外加电场作用下,与固体支持物接触的液体层发生移动的现象。电渗流:电渗现象中液体的整体流动。是毛细管电泳分离的主要驱动力,是毛细管中的溶剂因轴向直流电场作用发生的定向流动。其大小直接影响分析结果的精确度,准确度。9.(凝胶电泳)为什么要用...