疟原虫血涂片制作作业指导书1.目的指导实验室人员制作血涂片,完成疟原虫检测工作2.适用范围适用于实验室检测人员3.职责 疟原虫血涂片制作人员负责涂片编号及保存，4。作业指导4.1 样本采集及要求 4。1。1 采纳抗凝管采血：或在采血管里加入抗凝剂，将采集血样加入并摇匀，备用 4。1.2 指尖血、静脉全血（抗凝血)样本均可适用4.2 血涂片的制作： 4。2.1 血膜种类和位置 薄血膜:占玻片的近 1/2。将血液涂呈薄膜状,血细胞平辅在玻片上面 厚血膜：占玻片的 1/6。血液涂成圆形，血量多 4。2。2 厚血膜的制作用推片的一角，刮取约 4 ~ 5ul(火柴头大小)，使血滴与平置的载玻片接触，再由里向外旋转，转 4~ 8 圈直径 0.8 ~ 1cm 圆形厚血膜，血膜厚薄均匀，过厚易于脱落,过薄达不到检出率的要求。厚血膜厚度以油镜视野可见 5 ~ 10 个白细胞为宜。厚血膜血量:4~5ul 微升，外形:圆形，直径 0。8～1。0cm 4.2.3 薄血膜制作取洁净的载玻片 2 张,1 张以左手拇指，食指夹持载玻片两端,用另一张边缘平滑的载玻片做推片,用推片一端边缘的中点取血约1~1。5ul 的血量(小米粒大小）,使血滴与平置的载玻片接触,并形成 25~30 度夹角,待血液向两侧扩展宽约 2cm 时,均匀而迅速地轻轻向左推出（约 2。5cm 长）薄血膜血量:1～1.5ul 位置：玻片 1/2 外形：薄度均匀、无痕、长度：2。0~2.5cm 4.2。4 血膜编号：血膜编号： 血膜制成后，以防差错,待薄血膜干后用 B2 铅笔，在薄血膜的右上角或血膜底部，写上受检者的个人编号。4.3 血涂片固定及染色 4。3。1 甲醇固定薄血膜 载玻片略向下倾斜，从一侧挤出甲醇，试管平推下划即可.甲醇不能触碰到厚血膜 4。3.2 单张染色法在量筒内加 2ml 缓冲液或 ph7。0~7。2 净水， 滴加吉氏原液 4滴（每 ml2 滴），混匀,然后滴在已充分干躁的厚薄血膜上，染色 30min。 1 张玻片需 2ml 水，2 滴／ml 染液，染色 25-30min4。3.3 染色效果 血膜蓝中带紫色，假如血膜颜色偏红色， 说明染色偏酸性；血膜偏蓝色, 则为偏碱性。4.4 注意事项与其它因素 4。4.1 载玻片必须清洁无油污，拿玻片时拿侧楞，固定薄血膜时，甲醇不要触碰到厚血膜，放置 3 天以上的血片，在染色之前先用清水滴加在厚血膜上进行溶血，再进行染色，厚血膜干燥时不要高温加热，充分干燥后方可染色已稀释的吉氏染液，须在 30 分钟内用完，冲染液时，要漂洗以免冲掉厚血膜，将血膜标本(血膜面朝...
