疟原虫血涂片制作作业指导书1
目的指导实验室人员制作血涂片,完成疟原虫检测工作2
适用范围适用于实验室检测人员3
职责 疟原虫血涂片制作人员负责涂片编号及保存,4
1 样本采集及要求 4
1 采纳抗凝管采血:或在采血管里加入抗凝剂,将采集血样加入并摇匀,备用 4
2 指尖血、静脉全血(抗凝血)样本均可适用4
2 血涂片的制作: 4
1 血膜种类和位置 薄血膜:占玻片的近 1/2
将血液涂呈薄膜状,血细胞平辅在玻片上面 厚血膜:占玻片的 1/6
血液涂成圆形,血量多 4
2 厚血膜的制作用推片的一角,刮取约 4 ~ 5ul(火柴头大小),使血滴与平置的载玻片接触,再由里向外旋转,转 4~ 8 圈直径 0
8 ~ 1cm 圆形厚血膜,血膜厚薄均匀,过厚易于脱落,过薄达不到检出率的要求
厚血膜厚度以油镜视野可见 5 ~ 10 个白细胞为宜
厚血膜血量:4~5ul 微升,外形:圆形,直径 0
3 薄血膜制作取洁净的载玻片 2 张,1 张以左手拇指,食指夹持载玻片两端,用另一张边缘平滑的载玻片做推片,用推片一端边缘的中点取血约1~1
5ul 的血量(小米粒大小),使血滴与平置的载玻片接触,并形成 25~30 度夹角,待血液向两侧扩展宽约 2cm 时,均匀而迅速地轻轻向左推出(约 2
5cm 长)薄血膜血量:1~1
5ul 位置:玻片 1/2 外形:薄度均匀、无痕、长度:2
4 血膜编号:血膜编号: 血膜制成后,以防差错,待薄血膜干后用 B2 铅笔,在薄血膜的右上角或血膜底部,写上受检者的个人编号
3 血涂片固定及染色 4
1 甲醇固定薄血膜 载玻片略向下倾斜,从一侧挤出甲醇,试管平推下划即可
甲醇不能触碰到厚血膜 4
2 单张染色法在量筒内加 2ml 缓冲液或 ph7
2 净水, 滴加吉氏