铜绿假单胞菌检查简述铜绿假单胞菌(),习称绿脓杆菌,为假单胞菌属菌种,广泛分布在土壤,水及空气中,人和动物的皮肤、肠道、呼吸道均有存在,故可通过环境和生产的各个环节污染药品,本菌是常见的化脓性感染菌、在烧伤、烫伤、眼科及其他外科疾患中长引起继发感染,由于本菌对许多抗菌药物具有天然的耐药性,增加了治疗的难度。国内外药典均将铜绿假单胞菌列为检查项目之一。铜绿假单胞菌按增菌,分离、纯培养、革兰染色、镜检及生化试验等步骤进行检验。仪器、设备和用具(见大肠埃希菌)。试液、指示液无菌氯化钠溶液或磷酸盐缓冲液附录,。无菌氯化钠蛋白胨缓冲液附录。盐酸二甲基对苯二胺试液附录。盐酸试液附录。氯仿附录。培养基营养肉汤培养基附录。胆盐乳糖()培养基附录。营养琼脂培养基附录。溴代十六烷基三甲胺附录。绿脓菌素测定用培养基(琼脂)附录。明胶培养基附录。硝酸盐胨水培养基附录。对照用菌液铜绿假单胞菌()营养琼脂斜面培养物少许,接种至营养肉汤培养基内,于土°C 培养~后,用无菌氯化钠溶液稀释至,使对照菌加入量含〜(一般用量为),菌数测定在做阳性对照实验用营养琼脂浇碟或平板涂布经培养后计数确定。操作方法供试品的取样量(见细菌、霉菌和酵母菌计数)。供试液的制备(见细菌、霉菌和酵母菌计数);(大肠埃希菌)。增菌培养取胆盐乳糖培养基份,每份,份加入供试液(相当于供试品或)。另份加入与供试液等量的稀释剂作阴性对照。于 C 土 C 培养〜(必要时可延至)。阴性对照菌应无军生长。分离培养轻轻摇动上述增菌培养液,以接种环取〜环培养液(如有菌膜应挑取之),划线接种于溴代十六烷基三甲胺琼脂平板,于 C 土 C 培养〜。铜绿假单胞菌在该培养基平板上的典型菌落为扁平、圆形或无定形、边缘不齐,光滑湿润,呈灰白色,周边略呈扩散现象,在菌落相邻处常有融合现象。菌落周围常有水溶性蓝绿色素扩散,使培养基显蓝绿色,但亦有不产色素的菌株。菌落还有粗糙型和粘液型等,应注意挑选。纯培养供试品分离平板生长所述典型菌落或呈疑似菌落时,以接种针轻轻接触单个菌落的表面中心,沾取培养物,应挑取〜个疑似菌落,分别接种营养琼脂斜面,培养,作以下检查。革兰染色镜检革兰染色(见大肠埃希菌)。镜检铜绿假单胞菌为革兰阴性、无芽抱杆菌,单个,成对或成短链排列。生化试验用铜绿假单胞菌()做生化试验的阳性对照株。氧化酶试验取一小块白色洁净的滤纸置平皿内,以无菌玻璃棒挑取营养琼...