冷藏对烟蚜茧蜂营养物质积累与转化的影响工程讨论所），现配现用，氯化钠、蒸馏水。（3）糖类测定所用试剂。浓硫酸、葡萄糖、蒽酮、三氯乙酸、氢氧化钾、无水乙醇、蒸馏水等。以上所用化学试剂均为国产分析纯。2.1.3 仪器制冰机、冷藏柜、恒温水浴锅、多功能台式高速冷冻离心机、T6 新世纪紫外可见分光光度计、酶联免疫检测仪、移液枪、5mL 具塞玻璃管、容量瓶、烧杯、玻璃棒、研磨棒。2.2 试验方法将种蚜接种到 5 叶 1 心烟苗上，任其繁殖 2d 后去除母蚜。待烟蚜发育至 2～3 龄进行接蜂，当寄生蚜大量形成时，将寄生蚜叶片采摘置于 8℃±0.5℃恒温箱中，冷藏 5d 后清除未形成僵蚜的烟蚜和寄生蚜，将僵蚜叶转移至 3℃（吴兴富＼[5＼]等讨论发现烟蚜茧蜂蛹期的最佳冷藏温度为 3～5℃）冷藏箱中，每隔 10d、20d、30d、40d 取出，测定不同冷藏期烟蚜茧蜂（蛹）营养物质的变化及其羽化率。以未冷藏烟蚜茧蜂（蛹）为对比，每处理 3 个重复。2.2.1 脂肪的测定参照 Handel＼[16＼]和 Pennington＼[17＼]的方法，做了部分修改。图 1 烟蚜茧蜂脂肪含量测定标准曲线（2）脂肪的提取。取烟蚜茧蜂（蛹）20 头于 0.5mLEP 管中称重（蛹重），按重量体积比 1∶9 加入 PBS 缓冲液充分研磨后于 4℃下 1000r/min离心 10min。取中间澄清液，再以 4℃、1000r/min 离心 10min，取上清液20μL。取上清液 5μL 于另一只 1.5mLEP 管中，加入氯仿甲醇溶液 1000μL抽提 5min 后加濃硫酸 500μL，沸水浴加热 10min，流水冷却至室温。加香兰素试剂 1000μL，黑暗显色 20min。取 300μL 于酶标孔中，490nm 下测其吸光值。每处理 3 个重复。
