胎盘间充质干细胞的分离和培养VIP专享

胎盘间充质干细胞的分离，原代与继代培养及鉴定刘亭目录_ 、八 、， 前言干细胞(Stemcell,SC)是一种能够自我更新且未分化并可分化成两个或两个以上其它品系的细胞。在一定的条件下，干细胞能够分化成为多种成熟细胞类型。按照来源和分化潜能不同，干细胞可分为胚胎干细胞(Embryonicstemcell,ESC)和成体干细胞(Adultstemcell，ASC)两类。胚胎干细胞来源于早期的胚泡和胚胎内层的细胞群,并且具有向 3 个胚层细胞分化的能力。但是胚胎干细胞应用时产生的免疫排斥、体内实验中引发肿瘤生成以及所涉及的伦理问题等影响并制约了临床应用成体干细胞形成于原肠胚形成后的胎儿和成体组织,早期研究认为,成体干细胞主要分化为其来源组织的细胞类型。然而,近几年来的很多研究表明,成体干细胞具有能够分化成为除来源以外的其他胚层组织的能力。间充质干细胞(Mesenchymalstemcell,MSC)又称为基质干细胞，是属于成体干细胞的一种，最早从骨髓中分离而来。MSC 是由早期中胚层发育而来的非造血成体干细胞,该细胞在体外可以贴壁生长,并呈现梭状。胞质丰富,细胞核呈圆形，1-3 个核仁。在适当的条件下可以大量扩增，并转化为间充质祖细胞，进而分化成包括三个胚层的各种组织细胞，如脂肪、骨、软骨、内皮细胞、成纤维细胞等。MSC 具有低的免疫原性、能向肿瘤迁移、具有免疫调节和造血支持等功能，而且易于外源基因导入表达，是基因治疗中重要的载体细胞。此外，一些研究学者还发现，MSC 具有类似免疫抑制剂作用，可抑制 T 淋巴细胞在混合淋巴细胞中的免疫反应，并同时抑制 T 细胞的异基因增殖反应。所以，MSC 在治疗组织缺损、器官退行性疾病、肿瘤及免疫疾病具有相当广泛的应用前景。近年来 MSC 已逐步成为干细胞研究的热点(张慧娟等，2014)。目前所报道的间充质干细胞主要来源于骨髓，采用密度梯度离心法获得。虽然分离方法简便，但供者取骨髓需要经历一个比较痛苦的手术，并在取材过程中及取材后会有很高的感染机会；由于人体骨髓中间充质干细胞的含量极其稀少，每 105-106个单个核细胞中大约只有 1 个；而且随着年龄的增加，骨髓中间充质干细胞的数量、增殖和分化能力均显着下降，使其在研究和应用尤其是临床应用中受到限制。其他组织中，如动员的外周血、乳牙、脐带、脐血也存在间充质干细胞，然而，从这些组织中获得的细胞数量较为有限。以上因素，都限制了间充质干细胞在组织工程和临床中的运用。目前胎盘或脐带属于临床废弃物，容易获得，并...