单元过关检测(十)(建议用时：45分钟)1．(2019·安徽合肥九中测试)由腊梅凝集素基因控制合成的某种蛋白质能与蚜虫肠道黏膜上的受体结合，从而抑制蚜虫吸收营养物质。通过基因工程将腊梅凝集素基因转入烟草，可增强其抗蚜虫的能力。请回答下列问题：(1)在逆转录酶的作用下，能以腊梅凝集素基因产生的mRNA作为模板按照________原则获得cDNA片段，以获取腊梅凝集素基因片段。为使腊梅凝集素基因在烟草细胞中高效表达，需要把目的基因片段插入表达载体的________和________之间。(2)将表达载体导入烟草细胞常用的方法是__________，在该过程中需添加酚类物质，目的是________________。将腊梅凝集素基因转入烟草细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为________。(3)将转基因烟草幼苗与非转基因烟草幼苗隔区种植，并接种等量的蚜虫，一定时间后用________法统计蚜虫的种群密度，若__________________________________，则说明转基因烟草具有抗蚜虫能力。解析：(1)在逆转录酶的作用下，以腊梅凝集素基因产生的mRNA作为模板，按照碱基互补配对原则获得cDNA片段，进而获取腊梅凝集素基因片段。为使腊梅凝集素基因在烟草细胞中高效表达，需要把目的基因片段插入表达载体的启动子和终止子之间。(2)将表达载体导入烟草细胞常用的方法是农杆菌转化法，在该过程中需添加酚类物质，目的是吸引农杆菌感染烟草细胞(因为酚类化合物能够吸引农杆菌向其移动)。将腊梅凝集素基因转入烟草细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为转化。(3)蚜虫的活动能力极弱，可采用样方法调查其种群密度。将转基因烟草幼苗与非转基因烟草幼苗隔区种植，并接种等量的蚜虫，一定时间后统计蚜虫的种群密度，若转基因烟草幼苗区内的蚜虫密度低于非转基因烟草幼苗区，则说明转基因烟草具有抗蚜虫能力。答案：(1)碱基互补配对启动子终止子(2)农杆菌转化法吸引农杆菌感染烟草细胞转化(3)样方转基因烟草幼苗区内的蚜虫密度低于非转基因烟草幼苗区2．(2019·北京昌平三中期中)为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。回答下列问题：(1)酶D基因和转运肽基因所含的三种限制酶(ClaⅠ、SacⅠ、XbaⅠ)的切点如图甲所示，现为获得融合基因，研究人员采用PCR法扩增酶D基因，首先要依据基因的________设计引物，同时从拟南芥基因文库中获取转运肽基因，再用________和________酶处理两个基因后，即可得到________端与________端(填图中字母)相连的融合基因。(2)将上述融合基因插入图乙所示Ti质粒的TDNA中，构建________并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含四环素的培养基上，其目的是________________________，再利用液体培养基振荡培养，可以得到用于转化的侵染液。(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是_______________________，进一步筛选后获得转基因油菜细胞，该细胞通过________________技术，可培育成转基因油菜植株。解析：(1)研究人员依据基因的碱基序列设计引物，采用PCR法扩增酶D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因。在上述引物设计时，分别在引物中加入如图甲所示酶的识别序列，这样可以用ClaⅠ限制酶和DNA连接酶处理两个基因后，得到A、D端相连的融合基因。(2)将上述融合基因插入图乙所示Ti质粒的TDNA中，构建表达载体即重组质粒并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含四环素的固体平板上培养得到含融合基因的农杆菌(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞；将转基因植物细胞培养成转基因植株需要采用植物组织培养技术。答案：(1)碱基序列ClaⅠDNA连接AD(2)基因表达载体(“”或重组质粒)得到含融合基因的农杆菌(3)利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞植物组织培养3．(2019·山东省实验中学一模)某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题：(1)抗盐基因是否在烟草细胞中稳定遗传的关键是______________________。(2)在构建重组质...
