生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定【实验指导】一、实验原理某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖）与斐林试剂发生作用，可以生成砖红色沉淀。斐林试剂实际是 Cu2+的碱性溶液，能使具有自由醛基或酮基的糖氧化，Cu2+则被还原成砖红色的 Cu2O 沉淀。反应式为：CH2OH—（CHOH）4—CHO+2Cu(OH)2→CH2—OH—（CHOH）4—COOH+Cu2O↓+2H2O脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色。苏丹Ⅲ在脂肪中的溶解度比在酒精中的溶解度大，当用苏丹Ⅲ的酒精溶液处理含有脂肪的生物组织时，酒精中的苏丹Ⅲ进入脂肪中，将脂肪染成橘黄色。蛋白质与双缩脲试剂发生作用，可以产生紫色反应。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与 Cu2+络合成紫红色的化合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。二、目的要求初步学会鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。三、材料用具1．实验材料（1）做可溶性还原糖的鉴定实验，应该选择含糖量较高、颜色为白色或近于白色的植物组织，以苹果、梨为最好。（2）做脂肪的鉴定实验，应该选择富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前需浸泡 3～4 h。（3）做蛋白质的鉴定实验，可用浸泡 1～2 d 的黄豆种子（或用豆浆），或用鸡蛋蛋白。2．仪器和试剂（1）仪器：剪刀，解剖刀，双面刀片，试管，试管架，试管夹，大小烧杯，小量筒，滴管，玻璃漏斗，酒精灯，三脚架，石棉网，火柴，研钵，石英砂，纱布，载玻片，盖玻片，毛笔吸水纸，显微镜。（2）试剂：斐林试剂（主要由质量浓度为 0．1 g/mL 的 NaOH 溶液和质量浓度为 0．05 g/mL的 CuSO4溶液配制而成），苏丹Ⅲ或苏丹 IV 染液，双缩脲试剂，体积分数为 50%的酒精溶液，蒸馏水。 四、实验的方法、步骤1．可溶性还原糖的鉴定制 备 生 物 组 织 样 液取 样注 入 试 剂加热和观察2．脂肪的鉴定制备生物组织实验材料染色去浮色制作临时装片→放在显微镜下观察（先低倍镜后高倍镜）3．蛋白质的鉴定制 备 生 物 组 织 样 液注 入 组 织 样 液注 入 试 剂 A注入试剂 B观察颜色变化 五、实验成功的关键及注意事项1．实验成功的关键在于实验材料的选择（1）可溶性还原糖的鉴定实验中，最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官)，而且组织的颜色较浅，或近于白色的。经试验比较，颜色反应的明显程度依次为苹...
