生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定【实验指导】一、实验原理某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应
可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖)与斐林试剂发生作用,可以生成砖红色沉淀
斐林试剂实际是 Cu2+的碱性溶液,能使具有自由醛基或酮基的糖氧化,Cu2+则被还原成砖红色的 Cu2O 沉淀
反应式为:CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2—OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色
苏丹Ⅲ在脂肪中的溶解度比在酒精中的溶解度大,当用苏丹Ⅲ的酒精溶液处理含有脂肪的生物组织时,酒精中的苏丹Ⅲ进入脂肪中,将脂肪染成橘黄色
蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可以产生紫色反应
具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应
蛋白质的肽键在碱性溶液中能与 Cu2+络合成紫红色的化合物
颜色深浅与蛋白质浓度成正比
二、目的要求初步学会鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法
三、材料用具1.实验材料(1)做可溶性还原糖的鉴定实验,应该选择含糖量较高、颜色为白色或近于白色的植物组织,以苹果、梨为最好
(2)做脂肪的鉴定实验,应该选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前需浸泡 3~4 h
(3)做蛋白质的鉴定实验,可用浸泡 1~2 d 的黄豆种子(或用豆浆),或用鸡蛋蛋白
2.仪器和试剂(1)仪器:剪刀,解剖刀,双面刀片,试管,试管架,试管夹,大小烧杯,小量筒,滴管,玻璃漏斗,酒精灯,三脚架,石棉网,火柴,研钵,石英砂,纱布,载玻片,盖玻片,毛笔吸水纸,显微镜
(2)试剂:斐林试剂(主要由质量浓度为 0.1 g/mL 的 NaOH 溶液和质量浓度为 0.05 g/mL的 CuSO4溶液配制而成),苏丹Ⅲ或苏丹 IV 染液,双缩脲试剂,体积分数为 50%的酒精溶液,蒸馏水
四、实验的方法、步