专题 1 基因工程 1
1 DNA 重组技术的基本工具 1
2 基因工程的基本操作程序【高考目标导航】1、基因工程的诞生2、基因工程的原理及技术【基础知识梳理】一、基因工程的工具1、基因工程的概念：按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外 DNA 重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品
由于基因工程在 DNA 分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做 DNA 重组技术
2、DNA 重组技术的基本工具（1）限制酶全称：限制性核酸内切酶来源：主要从原核生物中分离纯化出来特点：识别双链 DNA 分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开
结果：产生黏性末端或平末端（2）DNA 连接酶类型：根据酶的来源不同，可分为 E·coliDNA 连接酶和 T4DNA 连接酶作用：连接双链 DNA 片段，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二脂键
（3）载体种类：通常利用质粒作为载体，另外还有 λ 噬菌体的衍生物、动植物病毒等质粒：化学本质：小型环状 DNA 分子 特点：能自我复制 有一个至多个限制酶切割位点 有特殊的标记基因二、基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取途径（1）目的基因： 编码蛋白质的结构基因
（2）获取目的基因的方法：从基因文库中获取利用 PCR 技术扩增目的基因用心 爱心 专心1通过 DNA 合成仪人工合成（3）PCR 技术扩增目的基因① 原理：DNA 双链复制② 过程：第一步：加热至 90～95℃DNA 解链；第二步：冷却到 55～60℃，引物结合到互补 DNA 链；第三步：加热至 70～75℃，热稳定 DNA 聚合酶从引物起始互补链的合成
2、基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心
（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使
