专题 5 DNA 和蛋白质技术第 16 课时 DNA 的粗提取与鉴定目标导航 1
了解 DNA 的物理性质
理解 DNA 粗提取以及 DNA 鉴定的原理
一、提取 DNA 的方法1.提取生物大分子的基本思路(1)选用一定的________或________方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子
(2)DNA 的粗提取就是利用 DNA 与________、________和________等在物理或化学性质方面的差异,提取 DNA,去除其他成分
2.提取 DNA 分子的基本原理(1)利用 DNA 的溶解性①DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同,利用这一点,选择适当浓度的 NaCl溶液就能使 DNA 溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离的目的
DNA 与蛋白质在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同
溶解规律2 mol/L NaCl0
14 mol/L NaClDNA在 NaCl 溶液中,浓度为________ mol/L 时溶解度________溶解析出蛋白质NaCl 浓度从 2 mol/L 降低过程中,溶解度逐渐增大部分发生盐析溶解由上表可以看出,在 NaCl 为 2 mol/L 时 DNA________,而部分蛋白质发生盐析而生成________,通过过滤可除去部分________;NaCl 为 0
14 mol/L 时 DNA________,过滤可除去溶解的部分________
②DNA 不____酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则____酒精
利用这一原理,可将 DNA 与蛋白质进一步分离
(2)利用 DNA 和蛋白质对酶、________和________的耐受性不同① 蛋白酶能水解蛋白质,但对________没有影响
② 大多数蛋白质不能忍受________的高温,而 DNA 在 80℃以上才会变性
③ 洗涤剂能够溶解