专题 5 DNA 和蛋白质技术第 16 课时 DNA 的粗提取与鉴定目标导航 1.了解 DNA 的物理性质。2.理解 DNA 粗提取以及 DNA 鉴定的原理。一、提取 DNA 的方法1．提取生物大分子的基本思路(1)选用一定的________或________方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。(2)DNA 的粗提取就是利用 DNA 与________、________和________等在物理或化学性质方面的差异，提取 DNA，去除其他成分。2．提取 DNA 分子的基本原理(1)利用 DNA 的溶解性①DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同，利用这一点，选择适当浓度的 NaCl溶液就能使 DNA 溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离的目的。DNA 与蛋白质在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同。溶解规律2 mol/L NaCl0.14 mol/L NaClDNA在 NaCl 溶液中，浓度为________ mol/L 时溶解度________溶解析出蛋白质NaCl 浓度从 2 mol/L 降低过程中，溶解度逐渐增大部分发生盐析溶解由上表可以看出，在 NaCl 为 2 mol/L 时 DNA________，而部分蛋白质发生盐析而生成________，通过过滤可除去部分________；NaCl 为 0.14 mol/L 时 DNA________，过滤可除去溶解的部分________。②DNA 不____酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则____酒精。利用这一原理，可将 DNA 与蛋白质进一步分离。(2)利用 DNA 和蛋白质对酶、________和________的耐受性不同① 蛋白酶能水解蛋白质，但对________没有影响。② 大多数蛋白质不能忍受________的高温，而 DNA 在 80℃以上才会变性。③ 洗涤剂能够溶解________，但对________没有影响。(3)DNA 的鉴定：DNA 在沸水浴的条件下，遇________会染成________。二、提取 DNA 及鉴定 DNA 的实验流程1．实验材料的选取实验材料的选择原则是选用________含量高的生物组织。有些材料不宜选用，如有些哺乳动物的成熟红细胞无细胞核，无法提取 DNA。实验中一般选用________或________作为实验材料。2．破碎细胞，获取含 DNA 的滤液(1)动物细胞一般采用____________破碎的方法。(2)植物细胞需要先用__________溶解细胞膜，再加入一定量________，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集________。归纳总结 动、植物细胞在获取 DNA 滤液方面的比较原理方法动物细胞(鸡血细胞)在低渗溶液中会吸水涨破在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液植物细胞(洋洗涤剂能够溶解细胞膜在切...
