【实验六】叶绿体中色素的提取和分离一、教学目的1.初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。2.探索叶绿体中有几种色素。二、教学建议在本实验的教学中,教师应该注意以下几点。1.本实验的步骤比较多,实验的时间比较紧,教师要 认真做好实验前的准备工作。实验和讲课可以穿插进行。2.实验课前,教师应要 求学生做好实验预习,理解实验原理,了解目的要求 和方法步骤。实验课上,教师应向学生 说明本实验的实验原理,使学生知道叶绿体中的色素之所以能够分离,是因为几种色素随层析液在滤纸上的扩散速度不同所致。3.在提取色素时,教师应提醒学生操作要迅速。剪碎叶片前要去掉叶柄和粗的叶脉,并且尽量将叶片剪得细碎些。制得的色素提取液,应加盖避 光,以免叶绿体中的色素在接触空气或光照下遭到破坏。4.分离色素前,教师要提醒学生注意以下几点。(1)裁取定性滤纸时,尽量注意双手不要接触纸面,以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸。(2)根据烧杯的高度制备滤纸条,让滤纸条长度高出烧杯 1 cm,高出的部分做直角弯折。在滤纸条的另一端剪去两角并在离顶端 1 cm 处画好滤液细线后,将弯折部分用胶水粘在培养皿内顶壁上。(3)画滤液细线时,用力要均匀,速度要适中,色素线以 3 mm 宽效果最佳。5.教师要合理安排好实验课的时 间。例如,每组两个学生分工合作,一人提取色素。另一人制备滤纸条,并让学生仔细观察实验结果,及时进行记录和讨论。6.为使学生了解自己探索的结果是否正确,教师应为学生提供 4 条色素带在滤 纸上正确分布的样品,供学生对照使用。7.有条件的学校,可以让学生自带实验材料(不同种类绿色植物的叶片),分不同的小组进行探索实验,找出最佳实验材料。此项内容也可以安排在课外生物科技活动小组进行。三、参考资料实验替代材料 在选择实验材料时，除菠菜外，蓖麻、棉花、向日葵、菜豆等植物的叶片均可选用。实验替代药品 提取液提取液除用丙酮外，还可以在加入 2～3 mL 丙酮后，再加入 2 mL 石油醚(这样可以提高类胡萝卜素的提取效果)。经过充分研磨、过滤、静置后，滤液分为两层，滤液中的色素浓缩了近一倍。层析液层析液还可以采用以下的配方。（1）20 份汽油 、2 份丙酮、2 份石油醚、1 份苯。将滤纸条直接用该层析液进行层析，就可以得到比较理想的效果。（2）9 份体积分数为 95%的酒精和 1 份苯混合。（3）汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠。（4）体积分数为 95%的酒精或 93 号汽油。
