河南省许昌市重点中学2012高三生物一轮复习 DNA的粗提取与鉴定导学案

第1讲 DNA的粗提取与鉴定【重难点突破】一DNA的理化性质有哪些1．DNA的溶解性 DNA分子和蛋白质等其他分子在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。 DNA不溶于酒精，但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一点，可以将DNA与蛋白质进一步分离。DNA与蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同。 溶解规律2mol/L NaCl O.14mol/L NaClDNA 溶解析出蛋白质 NaCl浓度从2 mol/L降低过程中，溶解度逐渐增大 部分发生盐析沉淀 溶解 由上表可以看出，在NaCl为2mol/L时DNA溶解，而部分蛋白质发生盐析而生成沉淀，通过过滤可除去部分蛋白质；NaCl为O.14 mol/L时，DNA析出，过滤可除去溶解的部分蛋白质。 2．DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响(DNA水解酶能水解DNA分子)，大多数蛋白质不能忍受60～80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。洗涤剂能够分解细胞膜但对DNA没有影响。从细胞中提取DNA可用洗涤剂来破坏细胞膜。3．DNA的鉴定 （1）二苯胺鉴定：在沸水浴的条件下，DNA被二苯胺染成蓝色。 (2)紫外线照射法：配制染色剂。用蒸馏水配制成万分之五的溴化乙锭(EB)溶液。将玻璃棒上缠绕的白絮状物抹于蜡纸上，再滴加1滴EB溶液染色；将蜡纸放在紫外灯(260 nm)下照射(暗室中)，可见橙红色的荧光(DNA的紫外线吸收高峰在280 nm)处。【典题演示1】1.（09江苏生物）下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述，正确的有（ ）A．提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞B．用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质用心 爱心 专心1C．蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的DNAD．蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化【答案】BD 【解析】本题主要考查DNA与蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度，以及血红蛋白分离及提纯和相关知识。A选项，在提取DNA时，如果是用动物的细胞需要用蒸馏水涨破，如果用植物细胞则不需要，而是用洗涤剂溶解细胞膜；用2 mol／L的NaCl溶液溶解DNA，然后过滤出蛋白质，再降低NaCl溶液的浓度，析出DNA。DNA和蛋白质样品都是带负电荷的，从负极向正极移动，移动的距离都和样品的分子量有关。C中透析用以出去小分子物质，DNA是大分子物质，D是常规方法比如用十二烷基磺酸钠，可以根据其分子大小及所带电荷性质进行分离纯化【变式训练1】1．（2010盐城三模）（多选...