生物选修三知识点专题 1 基因工程基因工程得概念基因工程就是指根据人们得愿望，进行严格得设计，通过体外 DNA 重组与转基因技术 ，给予生物以新得遗传特性，制造出更符合人们需要得新得生物类型与生物产品。基因工程就是在 DNA 分子水平 上进行设计与施工得，又叫做 DNA 重组技术 。（一）基因工程得基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要就是从原核生物中分离纯化出来得。（2）功能：能够识别双链 DNA 分子得某种特定得核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位得两个核苷酸之间得磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生得 DNA 片段末端通常有两种形式：黏性末端与平末端。2、“分子缝合针”——DNA 连接酶 (1)两种 DNA 连接酶（E·coliDNA 连接酶与 T4-DNA 连接酶）得比较：① 相同点：都缝合磷酸二酯键。② 区别：E·coliDNA 连接酶来源于 T4 噬菌体，只能将双链 DNA 片段互补得黏性末端之间得磷酸二酯键连接起来；而 T4DNA 连接酶能缝合两种末端，但连接平末端得之间得效率较低。(2)与 DNA 聚合酶作用得异同:DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已有得核苷酸片段得末端，形成磷酸二酯键。DNA 连接酶就是连接两个 DNA 片段 得末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备得条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存 。 ② 具有一至多个限制酶切点，供外源 DNA 片段插入 。 ③ 具有标记基因，供重组 DNA 得鉴定与选择 。 （2）最常用得载体就是质粒,它就是一种裸露得、结构简单得、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力得双链环状 DNA 分子。（3）其它载体： 噬菌体得衍生物、动植物病毒(二)基因工程得基本操作程序第一步： 目得基因得猎取 1、目得基因就是指： 编码蛋白质得结构基因 。2、原核基因实行直接分离获得，真核基因就是人工合成。人工合成目得基因得常用方法有反转录法 _ 与化学合成法 _ 。3、PCR 技术扩增目得基因（1）原理：DNA 双链复制 （2）过程：第一步：加热至 90～95℃DNA 解链 ； 第二步：冷却到 55～60℃，引物结合到互补 DNA 链 ； 第三步：加热至 70～75℃，热稳定 DNA 聚合酶从引物起始互补链得合成 。 第二步： 基因表达载体得构建 1、目得：使目得基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目得基因能够表达与发挥作用。2、组成：目得基因＋启动...
