第一章 细胞培育得基本原理与技术 现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术与发酵工程技术,而这些技术得进展几乎都与细胞培育有密切关系,特别就是在医药领域得进展,细胞培育更具有特别得作用与价值。比如基因工程药物或疫苗在讨论生产过程中很多就是通过细胞培育来实现得。基因工程乙肝疫苗很多就是以 C H O 细胞作为载体;细胞工程中更就是离不细胞培育,杂交瘤单克隆抗体,完全就是通过细胞培育来实现得,既使就是现在飞速进展得基因工程抗体也离不开细胞培育。正在倍受重视得基因治疗、体细胞治疗也要经过细胞培育过程才能实现,发酵工程与酶工程有得也与细胞培育密切相关。总之,细胞培育在整个生物技术产业得进展中起到了很关键得核心作用。 第一节 体外培育得概念 一、基本概念 体外培育(in v i tro c u l tu re) ,就就是将活体结构成分或活得个体从体内或其寄生体内取出,放在类似于体内生存环境得体外环境中,让其生长与发育得方法。 ●组织培育:就是指从生物体内取出活得组织(多指组织块)在体外进行培育得方法。 ●细胞培育:就是指将活细胞(尤其就是分散得细胞)在体外进行培育得方法。 ●器官培育:就是指从生物体内取出得器官(一般就是胚胎器官) 、器官得一部分或器官原基在体外进行培育得方法. 二、体内、外细胞得差异与分化 1、差异:细胞离体后,失去了神经体液得调节与细胞间得相互影响,生活在缺乏动态平衡得相对稳定环境中,日久天长,易发生如下变化:分化现象减弱;形态功能趋于单一化或生存一定时间后衰退死亡;或发生转化获得不死性,变成可无限生长得连续细胞系或恶性细胞系。因此,培育中得细胞可视为一种在特定得条件下得细胞群体,它们既保持着与体内细胞相同得基本结构与功能, 也有一些不同于体内细胞得性状。 实际上从细胞一旦被置于体外培育后,这种差异就开始发生了。 2、分化:体外培育得细胞分化能力并未完全丧失,只就是环境得改变,细胞分化得表现与在体内不同.细胞就是否表现分化,关键在于就是否存在使细胞分化得条件,如 Friend 细胞(小鼠红白血病细胞)在一定得因素作用下可以合成血红蛋白,血管内皮细胞在类似基膜物质底物上培育时能长成血管状结构,杂交瘤细胞能产生特异得单克隆抗体,这些均属于细胞分化行为。 第二节 细胞培育得一般过程 一、准备工作 准备工作对开展细胞培育异常重要,工作量也较大,应给予足够得重视,推备工作中某一环节得疏忽可导...