台盼蓝染色实验原理和步骤(2 页)Good is good, but better carries it
精益求精，善益求善
台盼蓝染色实验原理台盼蓝（Trypan Blue) 是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性，还常用于检测细胞是否存活
活细胞不会被染成蓝色，而死细胞会被染成淡蓝色
分子式：C34H24N6O14S4Na4，分子量: 960
82，可溶于水（10mg/ml)
实验原理：正常的活细胞，胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，使之不能够进入胞内；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞，胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色
通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡
因此，借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和
台盼蓝是组织和中最常用的死细胞鉴定染色方法之一
注意也有台盼蓝拒染现象
台盼蓝染色后，通过显微镜下或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞进行比较精确的定量
台盼蓝染色只需 3-5 分钟即可完成，并且操作非常简单
实验步骤：1、配制 4%台盼蓝：称取 4g 台盼蓝，加少量蒸馏水研磨，加至100ml，用滤纸过滤，4℃保存
使用时用 PBS 稀释至 0
2、胰酶消化贴壁细胞，制备单细胞悬液，并作适当稀释
3、染色：细胞悬液与 0
4%台盼蓝溶液以 9:1 混合混匀
04%）4、计数：在 3 分钟内，分别计数活细胞和死细胞
5、镜下观察，死细胞被染成明显的蓝色，而拒染呈无色透明状
6、统计细胞活力：活细胞率（%）= 活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）×100%注意：1
保存条件：室温保存
有潜在致癌危险，实验时穿实验服并戴一次性手套和口罩操作
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