巨噬细胞功能检测(4 页)Good is good, but better carries it
精益求精，善益求善
单核－巨噬细胞吞噬功能测定单核－巨噬细胞在机体免疫反应中起着重要作用，因此，检测单核－巨噬细胞功能对于了解机体的免疫功能状态具有重要意义
小鼠巨噬细胞吞噬功能试验（体外法）1、原理巨噬细胞具有吞噬异物的功能，将巨噬细胞与被吞噬物(鸡红细胞、白色念珠菌、白色葡萄球菌等)共同温育，染色，在油镜下计数吞噬异物的巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数，以此推断巨噬细胞的吞噬功能，从而评价机体的免疫状态
2、方法 (1)．小鼠巨噬细胞制备 实验前三天每只小鼠腹腔注射 1％可溶性淀粉 1 ml
实验时眼球放血、断椎处死小鼠，碘酒、洒精消毒皮肤，剪开腹部皮肤，暴露腹膜，用镊子夹起腹膜剪开一小口(注意避开血管)用生理盐水(或 1640)灌注腹腔，收集腹腔液于试管中(约 4 ml)，1500 r/min，离心 10 min，去上清，沉积细胞用生理盐水(或 1640)洗二次，离心转速、时间同上
最后沉积细胞用含 10％小牛血清 1640 配成适当浓度备用(1~2×106／ml)
(2)被吞噬物的制备 1）．鸡红细胞制备 从鸡翼下抽取静脉血，加入 5 倍量Alsever 液(2
05 g 葡萄糖，0
42 g NaCl，0
8 g 枸橼酸钠 5H2O、0
55 g 枸椽酸，加双蒸水到 100 ml，加热溶解后过滤分装，8 磅高压灭菌，4℃保存)，置 4℃可以保存 1个月
用前取适量鸡红细胞悬液，用 PBS 洗涤二次后配成1％的浓度备用
2）．白色念珠菌制备 将白色念珠菌接种于沙氏平皿培育基中，培育 48 小时，收集菌，用适量生理盐水配成悬液，100℃，煮沸 30 min 灭活，离心去掉上清，再用 1％美兰染色 30 min，用生理盐水洗涤二次，用生理盐水配成1×108／ml 菌悬液，
